根据2020年癌症统计数据可知,我国肝癌新发病例数在所有癌症中排名第五,死亡病例数据排名第二,严重危及到我国人民的健康。已有研究表明,人参皂苷CK具有保肝抗癌活性,本研究通过从三七根中提取、转化、分离得到纯度较高的人参皂苷CK,并验证其对肝癌转移的影响;其次通过对人参皂苷CK的结构修饰,构建出活性更高的化合物,通过体内外实验验证这种衍生物的抗肝癌活性及机制,从而为以人参皂苷CK为基础的肝癌治疗药物的开发理论与数据基础。论文主要研究内容如下:（1）人参皂苷CK的制备本文以三七根为原料,将其研磨成粉后,采用有机溶剂浸提法提取出其中的总皂苷。经过对浸提溶剂的种类、浸提比例、浸提温度以及浸提时间的优化,最终确定采用更为安全环保的乙醇作为提取溶剂,溶剂体积（m L）:原料质量（g）为6:1,在45℃条件下提取40分钟,重复三次提取,得到三七总皂苷含量为41.58%的提取物,总皂苷提取率可达到83.29%。再经过四种不同大孔吸附树脂对提取物中总皂苷进行分离,最终确定采用D101树脂,可实现二醇型与三醇型人参皂苷的一个较好的分离效果。之后,采用蜗牛酶转化法,将二醇型人参皂苷转化为稀有人参皂苷,对转化条件进行单因素及响应面法优化,确认最优转化条件为底物浓度1.4 mg/m L,酶浓度1.6mg/m L,反应温度50℃,反应时间36 h,缓冲液p H 5.5时,可得到人参皂苷CK含量较高（41.31%）的转化产物。接下来对转化产物使用乙醇反复浸提以除去不溶性杂质,再通过制备型高效液相色谱进行分离,得到高纯度的人参皂苷CK单体,经分析型液相检测其纯度可达到98%以上。（2）人参皂苷CK对缺氧诱导的肝脏EMT的影响及作用机制本文首先通过体外细胞毒性（MTT试验）检测了人参皂苷CK对多种肿瘤细胞的活力影响,从中筛选出较为敏感的肝癌细胞进行实验。采用Co Cl2和TNFα对肝癌细胞进行诱导,并分别用不同浓度人参皂苷CK进行处理验证CK对不同条件下肝癌细胞上皮间充质转化（EMT）的影响。免疫印迹与RT-q PCR结果显示肝癌细胞中HIF-1α信号通路与NF-κB通路之间存在互相调节的作用,并且两个信号通路对肝癌细胞EMT都有促进作用。划痕实验与transwell迁移实验结果证明人参皂苷CK可以抑制缺氧诱导的细胞转移能力的增强。从机制上看,人参皂苷CK可以抑制HIF-1α/NF-κB信号转导以及缺氧诱导或TNFα刺激的肝癌细胞系中EMT相关蛋白和细胞因子的表达水平。因此,研究推测人参皂苷CK可以通过靶向HIF-1α/NF-κB反馈作用来降低肝癌转移潜力,是一种潜在的肝癌治疗方式。（3）人参皂苷CK衍生物对肝癌的抑制作用及其机制本研究对人参皂苷CK的结构进行了乙酰化修饰修饰,形成了一种新的衍生物（CK-3）,并对该衍生物的抗肿瘤性能和机理进行了探讨。通过对多种肿瘤细胞体外毒性分析,结果显示,CK-3能抑制多种肿瘤细胞株的增殖,并且其作用浓度较CK呈现明显的降低。通过流式细胞术等检测方法,结果证明CK-3可以通过诱导肝癌细胞周期阻滞和细胞凋亡从而抑制肝癌细胞增殖。同时,在体内实验中,CK-3也显著抑制了肝癌异种移植模型中肿瘤的生长,且对主要器官的生理功能没有明显的毒副作用。从作用机制上来看,CK-3促进了肝癌细胞和肿瘤组织中YAP1的磷酸化,降低转录因子TEAD2的表达。研究结果说明人参皂苷CK衍生物可能通过调节Hippo-YAP1-TEAD2信号通路来调控肝癌的发展。