对羟基苯甲酸丙酯对果蝇生殖及寿命影响的研究

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对羟基苯甲酸酯(又称尼泊金酯,p-hydroxybenzoic acid esters)因其抗菌谱广,具有高效、低毒、广谱、易配伍等优点,广泛应用于日化、医药、食品、饲料及各种工业防腐领域,同时也是医疗器械的清洗消毒剂。食品防腐、杀菌是其主要用途,也是我国重点发展的替代苯甲酸钠等食品防腐剂的产品之一。我国使用的防腐剂仍以苯甲酸钠为主,对羟基苯甲酸酯的毒性比苯甲酸钠小,用量也比苯甲酸钠少,已经成为我国重点发展的防腐剂之一。虽然我国的尼泊金酯研究开发应用较晚,但目前已成为防腐、灭菌等研究的热门课题之一。大量研究证实,对羟基苯甲酸酯不仅可以影响动物子宫重量、睾丸和附睾的精子数量及精子形态,而且在肿瘤细胞增殖、受体竞争结合实验和体外重组酵母雌激素试验等各个方面也有显著作用。果蝇是生物学研究中最重要的模式生物之一,而且许多基因与人类的基因具有序列同源性,选取其作为研究生殖和衰老方面的材料具有其他生物无法比拟的优势。在日常生活中,由于对羟基苯甲酸酯在各个领域广泛地使用,人们可以通过各种途径吸收,且在体内有了一定的积累。分析对羟基苯甲酸酯对黑腹果蝇的影响,可以推知该类物质对人类健康可能构成潜在的威胁,深入探讨其在毒理学方面的主要影响,全面评价酯类作为防腐剂是否可以安全使用,从而保护人类健康。鉴于我国只允许对羟基苯甲酸乙酯(Ethyl p-Hydroxybenzoate, EP)和对羟基苯甲酸丙酯(Propyl p-Hydroxybenzoate, PP)作为食品防腐剂使用,且丙酯可以影响精子的生成,所以本论文选取PP处理果蝇,探索其对果蝇生殖及寿命的影响。在五个不同PP浓度(对照组:0.00%,低浓度组:0.02%、0.05%,高浓度组:0.10%、0.20%)作用下,研究了雌雄果蝇的存活率、中间寿命、平均寿命、最高寿命与90%存活时间、发育周期、抗激能力(包括抗饥饿能力、抗热激能力以及攀爬能力)、不同天龄段体内SOD活力以及MDA含量,同时还分析了其F1代雌雄个体在发育过程中体重的变化。分析了对羟基苯甲酸丙酯对果蝇生殖与寿命的作用以及二者之间存在的关系,并探讨其对黑腹果蝇的毒性作用。实验结果表明:1.低浓度和高浓度PP作用于亲代雌雄果蝇,均可促使其生殖能力降低;对其F1代雌雄果蝇给予相同处理时,低浓度可使F1代生殖能力增强,而高浓度则显著降低F1代的生殖能力。2.不同浓度PP作用于成体未交配雌雄果蝇,低浓度0.02%、0.05%和高浓度0.20%PP组可使雌雄果蝇的存活率、中间寿命、平均寿命与最高寿命均明显缩短,而高浓度0.10%PP作用时雌雄果蝇寿命的各项指标均显著升高,说明PP可以影响果蝇的寿命。3.PP作用于成体未交配雌雄果蝇,低浓度0.02%、0.05%PP组雌雄果蝇的抗饥饿能力、抗热激能力及攀爬能力与对照组相比变化不明显,而高浓度0.20%PP组可加速雌雄果蝇的衰老过程,使其抗饥饿能力、抗热激能力以及攀爬能力均显著降低,相反0.10%PP组雌雄果蝇的攀爬能力与对照组相比均有所增强。4.低浓度0.02%、0.05%和高浓度0.20%PP组均降低了雌雄果蝇体内的SOD酶活表达量,而高浓度0.10%PP组则提高了SOD的表达;对于MDA含量而言,在整个发育周期中,低浓度0.02%、0.05%和高浓度0.20%PP组雌雄果蝇的MDA含量均高于对照组,而0.10%PP组雌雄果蝇MDA含量却增加较缓慢。5.分别选取对照组未交配雌雄果蝇放于不同浓度PP培养基中培养并使之交配,结果发现,除了低浓度0.05%PP组F1代雌果蝇体重与对照组相比显著增加外,各PP组F1代雌雄果蝇体重均比对照组低,且随着PP浓度的增加体重逐渐下降。6.低浓度0.02%、0.05%PP组可使F1代雌雄果蝇的发育周期缩短,而高浓度0.10%、0.20%PP组却使其发育周期显著延长,说明PP可以影响果蝇的生长周期。
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