强直性脊柱炎患者外周血Th1/Th17/Treg比率及其相关转录因子和细胞因子表达水平的研究

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目的:通过检测强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血单个核细胞CD4+Th1、CD4+Th17、CD25+Treg细胞比率及其相关转录因子和细胞因子表达水平,分析这些指标与AS的关联性及不同亚群T细胞之间可能存在的调节关系,探讨AS发病可能的细胞免疫机制,为AS的防治提供实验依据。方法:按照1984年修订的AS纽约标准选取AS患者为AS患者组(50例),按照活动度分为稳定组(ASDAS﹤2.1)26例、活动组(ASDAS≥2.1)24例;选取健康体检者作为健康对照组22例。分离外周血单个核细胞(PBMCs),应用流式细胞术(FCM)检测CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞、CD4+IL-17+Th17细胞及CD4+IFN-γ+Th1细胞的比率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中Th1、Th17与Treg细胞相关细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、IL-23、IFN-γ、TGF-β)的水平;同时用荧光定量PCR检测Th1细胞、Th17细胞、Treg细胞的特异性转录因子T-bet、RORC、FoxP3的mRNA表达水平。以SPSS17.0软件包进行统计分析,实验数据以x±s表示。均数间的比较采用t检验、方差分析、重复测量资料的多变量分析和线性相关分析等,以α=0.05作为显著性检验标准,并分析这些指标与AS活动度指数(ASDAS)的关联性及指标之间可能存在的关系。结果: AS活动组中CD4+IFN-γ+Th1细胞与CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞的比率较稳定组和健康对照组显著降低(P﹤0.05),CD4+IL-17+Th17细胞的比率较AS稳定组和健康对照组显著升高(P﹤0.05);AS活动组血清中IL-1β,IL-6,IL-17,IL-23水平较AS稳定组、健康对照组明显升高(P﹤0.05),而IL-2、IFN-γ、IL-10、TGF-β的含量活动组较低,但差异无统计学意义(P>0.05);AS患者RORC的mRNA表达水平显著升高(P﹤0.05),而T-bet和FoxP3的mRNA表达降低(P﹤0.05),且AS活动组T-bet mRNA/RORC mRNA、FoxP3mRNA/RORCmRNA比值较健康对照组有显著改变(P﹤0.05);AS患者血清中T-bet的相对表达量与RORC呈负相关,与FoxP3呈正相关,三者均与ASDAS有显著相关性;细胞因子IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β均与ASDAS有显著相关性(P﹤0.05),且IL-17、IL-23呈显著相关(P﹤0.01)。结论:AS患者外周血存在高表达的Th17细胞及其相关转录因子、细胞因子和低表达Th1细胞、Treg细胞、T-bet、FoxP3,且与ASDAS呈显著相关。AS患者外周血Th17/Treg/Th1细胞平衡失调,并且与AS的病程密切相关。
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