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研究目的：检测miR-338-5p在结直肠癌组织和细胞系中的表达,探索miR-338-5p对结肠癌细胞的增殖、凋亡的影响,并明确miR-338-5p调控的靶基因,以探讨miR-338-5p在结直肠癌的发生、发展中的作用,为结直肠癌的诊断和治疗提供新的靶点。研究方法：1.运用实时定量PCR方法检测miR-338-5p在40例结直肠癌组织及相应癌旁组织,和4种结肠癌细胞株HCT-116、HT-29、SW480和SW620中的表达情况,并与患者的临床病理特征进行相关性分析。2.根据miR-338-5p在结直肠癌组织及细胞中的表达情况,选出miR-338-5p表达相对较低的结肠癌细胞两株,使用LipofectamineTM2000脂质体瞬时转染miR-338-5p mimics及Negative control,通过实时荧光定量PCR验证miR-338-5p在细胞中的表达的情况。3.应用CCK-8实验检测miR-338-5p对结肠癌细胞增殖能力的影响；应用流式细胞仪检测miR-338-5p对结肠癌细胞凋亡的改变及细胞周期的分布。4.应用生物信息学软件和在线网络数据库预测miR-338-5p调控的靶基因；构建靶基因的荧光素酶载体,运用双荧光素酶报告基因实验验证miR-338-5p的靶基因；并通过Western blot检测靶基因及其下游信号通路主要调控蛋白的表达变化。研究结果：1.miR-338-5p在癌组织中的表达低于癌旁组织,两者有显著差异性(P<0.05)；但miR-338-5p的表达与患者的临床病理特征的相关性分析无统计学意义。miR-338-5p在结肠癌细胞株HCT-116、HT-29、SW480和SW620中均有表达,其中在HCT-116和SW620细胞中的表达相对较低。2. miR-338-5p对HCT116和SW620细胞生物学行为影响的实验研究：RT-PCR法检测HCT116和SW620细胞瞬时转染miR-338-5p mimics后显示：miR-338-5p过表达成功；CCK-8实验显示：miR-338-5p过表达后,HCT116和SW620细胞增殖能力减弱；细胞凋亡实验显示：miR-338-5p过表达后,HCT116和SW620细胞总凋亡率增加(14.44+0.67%VS7.98+0.36%, P<0.01;10.5+0.2%VS8.43+0.5%, P<0.01);细胞周期结果显示：miR-338-5p过表达后,HCT116和SW620细胞周期多处于G1期(78.41+1.35%VS72.87+1.83%, P<0.01;68.76+0.41%VS54.89+0.78%, P<0.01)。3.生物信息学软件和在线网络数据库预测显示：miR-338-5p的靶基因为KRAS;双荧光素酶报告基因实验证实了KRAS为miR-338-5p的靶基因；Western blot检测显示：过表达miR-338-5p后,KRAS基因及其下游Raf/MEK/ERK和PI3K/AKT通路中的p-ERKl/2和p-AKT的表达下调。研究结论：miR-338-5p可能是结直肠癌抑制因子,在肠癌发生过程中,miR-338-5p通过对靶基因KRAS的抑制,从而抑制肠癌细胞的分裂增殖、促进肠癌细胞凋亡,发挥抑制肿瘤的作用。从而提示miR-338-5p有望成为结直肠癌新的诊断指标及治疗靶点。