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目的核因子κB (nuclear factorκB,NF-κB)是近年来受到广泛研究的真核细胞转录调控因子,它能与多种细胞基因的启动子和增强子发生特异性结合,促进相关基因的转录和表达。研究表明NF-κB是胃癌发生发展中的关键因素之一。其激活亚基NF-κB p65可反式激活很多基因,如cyclinD1,血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)、黏附分子(ICAM-1)、多药耐药基因(MDR)等,进而调节肿瘤细胞的增殖、凋亡抵抗、血管形成、侵袭转移和耐药[1-2]。因此,本实验选取p65作为研究靶点,通过RNA干扰技术抑制NF-κB p65基因表达,同时联用化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu),观察该基因对胃癌细胞增殖、凋亡及5-Fu耐药性的影响。方法①实验分为空白对照、脂质体组、单纯药物5-Fu干预、单纯siRNA干预,以及转染联合加药共5组。②利用阳离子脂质体LipofeetamineTM2000将人工合成的NF-κB P65 siRNA转染入SGC7901胃癌细胞株中。免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB P65蛋白表达水平;Annexin V- PI法检测细胞凋亡。③四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定五组不同浓度(50,75、100、150、200mg/L)NF-κB p65 siRNA转染入SGC7901后细胞的生长情况。结果①NF-κB p65蛋白在空白对照组和脂质体组中高表达,在各试验组中低表达。与空白对照组相比,后三组均有明显抑制SGC7901细胞NF-κB P65表达的作用,其表达抑制率分别是41.91%、50.68%和71.28%。②各组早期凋亡率分别为1.4±0.20 %、2.36±0.58%、6.68±0.34 %、6.60±0.64%和21.62±1.12 %。药物5-Fu和siRNA均明显诱导细胞凋亡,但以联合组抑制作用最强;后三组早期凋亡细胞分别是空白对照组的5倍、4倍和16倍。③MTT结果显示,转染组胃癌细胞的增殖活性随着siRNA浓度增加和作用时间延长,下降趋势较显著。结论siRNA能有效抑制NF-κB p65基因表达,从而抑制SGC7901细胞增殖、促进凋亡,增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本实验提示可将阻断NF-κB信号通路作为基因治疗的靶点。