首先，对微甘菊愈伤组织诱导和继代增殖培养进行系统研究，愈伤组织诱导研究表明：外植体中芽尖诱导率最高，在含2，4-D2.0mg／L、KT1.0mg／L、pH5.8的MS培养基上25℃黑暗条件下愈伤组织诱导效果较好。继代培养的关键问题在于褐变控制，继代培养的优化条件为：培养基添加5.0mg／L的抗坏血酸（Vc），激素比例改用2，4-D0.5mg／L+NAA2.0mg／L+KT0.5mg／L+BA0.5mg／L，添加15％新鲜椰子汁，于2000lx光照16h／d培养，在细胞生长对数期进行继代转接。并对微甘菊细胞悬浮培养条件进行研究，结果表明，微甘菊细胞生长适宜的碳源是蔗糖，并且较合适的蔗糖浓度为30g／L；在不同蔗糖浓度下氨基氮的吸收差别不大，氨基氮在迟滞期和对数期前期已基本消耗完毕，对数期生长主要利用硝基氮，因而提出，在微甘菊细胞液体悬浮培养中，氮源可以采用初始低氨基氮浓度，对数期中间维持高硝基氮，而且对数期中逐步流加少量的氨基氮；微甘菊细胞迟滞期分裂启动存在密度依赖现象，对数期生长存在密度抑制现象，最适接种量为40g／L。微甘菊细胞悬浮培养一个周期的生长基本呈现典型的S型曲线。和玫瑰茄相比，微甘菊生长曲线对数期时间比玫瑰茄多2d；玫瑰茄培养渡过对数期之后很快就进入衰亡状态，而微甘菊培养第13d～16d这四天减慢期生长依然旺盛。 然后，本文系统研究了微甘菊和玫瑰茄原生质体制备与再生的条件。结果表明，较好的原生质体分离方案为：取微甘菊和玫瑰茄新鲜愈伤组织或悬浮培养对数期细胞系作为材料； 采用降糖、添加L-半胱氨酸和质壁分离三者结合的方式进行对两种植物细胞材料进行预处理；采用混和酶解液（组合为2％Celluase+0.5％Hemicellulase+0.2％Pectinase+CPW盐溶液+0.65mol／L甘露醇+0.1％2-N-吗啡啉乙磺酸+10mmol／L CaCl₂，pH5.7）26℃低速振荡酶解，微甘菊最适酶解时间为4h，玫瑰茄最适酶解时间为3h。低熔点琼脂糖包埋法比较适合培养原生质体；原生质体最适培养密度为5×10⁵个／mL；采用KM8p培养基有利于原生质体的持续分裂和生长；最佳激素组合为：IAA 1.0mg／L+2，4-D 0.05mg／L+KT0.1mg／L；26℃培养温度和黑暗条件有利于原生质体再生成愈伤组织。 继而，将微甘菊与玫瑰茄进行不对称融合。融合前将供体微甘菊原生质体进行UV辐射处理，研究UV对原生质体分裂及生长的钝化作用，结果表明辐射强度300μW／cm²时处理时间6min为宜；将受体玫瑰茄原生质体用16mmol／LIOA预处理10min钝化。试验了融合过程各因素对融合效果的影响，结果表明：PEG6000对融合率影响最显著，其浓度以40％最好；甘露醇浓度和pH高低对促融效果影响也比较明显，甘露醇以0.7mol／L为宜，pH值为9.5时最好；另外CaCl₂·2H₂O和KH₂PO₄。