目的:应用蛋白质组学技术观察顺铂作用于人卵巢癌SKOV3细胞,蛋白质分子的差异表达情况,探讨蛋白质组学方法在在化疗药物抗肿瘤作用机制研究方面的应用。 方法:用顺铂(6μg/ml)作用人卵巢癌SKOV3细胞6小时,检测实验组与空白对照组蛋白质的表达情况。 1) 收集裂解细胞,提取细胞内总蛋白。 2) 双向电泳:以固相IPG胶条(17cm,PH4-7)为载体,进行第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳。 3) 考马斯亮蓝染色,在PDQuest软件的辅助下进行实验组与对照组蛋白质表达的比较,切取差异点。 4) 质谱分析:肽质量指纹谱(PMF)和串级质谱(MS/MS),检测出差异点中包含的主要蛋白。 结果:得到实验组与对照组两幅双向电泳凝胶图,选择明显差异点11个。通过质谱分析显示,顺铂处理后表达明显上调的有原肌球蛋白(tropomyosin)家族、肌动蛋白(actin)家族、热休克蛋白60(HSP60)、磷酸丙糖异构酶(TIM)家族等;表达下调的有烯醇酶(enolase)家族等。