清化血浊法治疗缺血性脑损伤的作用及机制研究

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目的:探讨清化血浊法治疗缺血性脑损伤的理论依据,初步研究缺血性脑损伤过程“血浊”和“浊伤脑络”的特征表现,以及清化血浊法治疗缺血性脑损伤的疗效及其分子生物学机制。方法:以“浊伤脑络”理论为依据组方化浊行血汤应用于实验研究。以线栓法MCAO大鼠为实验对象,通过观察MCAO大鼠脑缺血后神经功能损伤、脑梗死体积、缺血中心区和缺血周边区细胞凋亡率、坏死率的变化,探讨化浊行血汤对缺血性脑损伤的治疗作用;通过观察MCAO大鼠血清TNF-α、IL-1β、sICAM-1的变化以及化浊行血汤的干预作用,探讨缺血性脑损伤过程“血浊”的特征性表现以及化浊行血汤清化血浊护脑的生物医学实质。在对化浊行血汤干预缺血性脑损伤的细胞分子学机制研究中,以离体血管内皮细胞、星形胶质细胞为实验对象,利用血清药理学方法和流式细胞学技术,通过观察缺氧血管内皮细胞粘附因子ICAM-1、VCAM-1、P选择素、E选择素的表达、细胞活力MTT比色,探讨化浊行血汤含药血清对内皮细胞的保护作用及其对炎性反应的抑制作用;通过观察缺氧后脑星形胶质细胞诱导型一氧化氮合成酶的表达和一氧化氮释放的影响,探讨化浊行血汤含药血清对活化星形胶质细胞释放一氧化氮自由基的拮抗作用。结果:化浊行血汤能明显改善MCAO大鼠的神经功能缺损,缩小脑梗死体积,降低缺血周边区的细胞凋亡率,抑制MCAO大鼠血清TNF-α、IL-1β、sICAM-1的异常升高;化浊行血汤含药血清能明显提高缺氧内皮细胞的活力,同时拮抗内皮细胞P选择素、ICAM-1、VCAM-1等粘附因子的表达,降低胶质细胞诱导型一氧化氮合成酶的表达以及一氧化氮的释放。结论:“浊伤脑络”是缺血性中风的主要病机,血浊是各种致病因素导致缺血性中风发生发展的共同途径。化浊行血汤可通过抑制缺血性脑损伤的炎性反应,实现神经保护作用,发挥清化血浊法对缺血性卒中的治疗作用。
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