研究背景 经皮冠状动脉成形术（PTCA）是现今治疗冠心病的有效手段，但再狭窄（RS）严重影响着PTCA的远期疗效。 目的： 本研究课题从以下3个方面系统观察电离辐射防治PTCA术后RS的剂量疗效关系、时间疗效关系、安全性、可能的作用机制以及临床应用情况。（1）通过组织病理学、血管造影和血管内超声（IVUS）检查，观察血管内照射（IR）对猪受损髂动脉内膜增生和血管重构的影响，以及观察IR对受损动脉平滑肌细胞（SMC）增殖与凋亡的影响；（2）观察体外培养的兔动脉SMC对γ射线照射的剂量-时间反应关系，探讨γ射线抑制SMC增殖的细胞与分子生物学机制；（3）观察冠脉内放射治疗（ICBT）支架内再狭窄（ISR）的临床疗效及安全性。 方法： 1、（1）对中国小型猪髂动脉进行血管造影及IVUS检查后，通过球囊扩张损伤术建立髂动脉狭窄模型。实验组通过置源管将高剂量铱-192(¹⁹²Ir)后装源对受损髂动脉分别施予10Gy、20Gy与30.5Gy的IR治疗。对照组受损髂动脉置入假源。分别观察术后28天时受损髂动脉形态学及组织学变化。（2）观察猪受损髂动脉20GyIR治疗后第3天、10天及28天时的血管形态学及组织学变化。（3）通过对髂动脉球囊损伤前、损伤后第28天以及20GyIR治疗后第28天时的IVUS检查，观察IR防治受损动脉狭窄形成的疗效及IR对血管重构的影响。（4）通过光镜、增殖细胞核抗原（PCNA）、透射电镜及三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（TUNEL）技术检测10Gy与20GyIR后不同时间对受损动脉中膜与内膜SMC增殖及凋亡的影响。 南京医科大学博士学位论文 2、山取兔胳动脉中膜SMC进行原代培养，经过抗肌球蛋白 hyos i n)单抗免疫细胞化学法及透射电镜来鉴定 SMC的性质。取 第 5刁代 SMC经无血清 DMEM孵育 24小时同步化处理，用“COY射线 进行2．SGy、SGy、lmy、2皿y及30Gy一次性照射，随即分别继续 培养扣小时、24小时及72小时，通过’卜TdR参入法、流式细胞仪＠分析、微核试验和电镜观察丫射线对删C的加A合成、增殖周期及 损伤的影响。Q)通过原位杂交方法检测y射线对驯C的 C｛OS与 PS 3基因表达的影响。＠、、，，。。、t－．—．—．—一、—，·——、·一 3、A选单支血管支架内再狭窄门 厂患者 5例，经冠状动脉 造影（CAG）或以G力。IVUS检查证实后进行再次PTCA术及”Sr／Y 厂射线 18．4Gy ICBT，观察 ICBT前后血像、。c肌酶谱及mP的变 化，并进行ICBT后6个月的临床随访与以C复查观察，了解患者 临床和ISR情况。 结果： 1、＊)对照组动脉球囊损伤后第 28天时发生明显内膜增生及 管腔狭窄，20Gy与 30．SGy IR实验组可见新生内膜增生明显受抑 制、管腔面积及外弹力膜恤EM)包绕面积缩，J、显著减轻。Q)动脉 内膜损伤后 10～28天时，由于内膜增生与血管命性重构的共同作用 使血管腔发生明显狭窄；与损伤对照组相比，z0Gyln组在治疗后第 3天、m天及28天均可见新生内膜面积及厚度增加较少、血管腔 面积和EEM内面积相对增加，最终使血管狭窄明显减轻。ZoGy IR )台疗对血管壁胶原含量无明显影响，也未见放疗并发症。（3）IVU 检查发现，动脉内膜损伤后 28天时 EEM内面积、管腔横截面积以．及管腔最小径均较损伤前明显缩小（p＜0刀5）；血管腔发生明显狭 窄；20Gy IR后，管腔横截面积与管腔最小径均较损伤对照组明显 增加巾叼．05)，＊＊M横截面积也较对照组有所增加（但未达到统＠计学意义），20Gy IR治疗后使管腔狭窄显著减轻。（4与损伤对照 组相比，10Gy或 20Gy IR治疗后，第 3d时可见中膜 SMC增殖明 显受抑（p＜0．05）；第 10d时可见内膜 SMC增殖明显受抑（p＜0．05）， 4 南京医科大学博士学位论文 20吻组抑制作用强于 10Gy 组；第 28d时，10Gy或 20…组均可 见内膜SMC增殖明显受抑（p＜0，05）以及中膜与内膜SMC凋亡率 显著增加（p均叼刀5）；对内膜＊＊C增殖的抑制作用及凋亡的诱导 作用以 20Gy强于 10Gy（p均＜0．05）；IR治疗后，血管内膜SMC ；N亡率在第 28d时最明显。＠ 2、＊）在Y射线工5－SGy以上一次性照射时，SMC明显呈剂 量依赖性地增殖受抑并产生GJG；期阻滞。Y射线低剂量＠（”2·5巧＊）照射后2竹左右可见细胞凋亡增加，而高剂量 户2．5叼)照射可使SMC发生坏死。m低剂量y射线照射后早期 （4h左右）SMC C－fos InRNA表达减少，p53 mRNA表达增加；而 高剂量V射线照射和低剂量Y射线照射后24h及72h时C－fos与p53 基因表达无明显变化。 3、所有ISR