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背景和目的:不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)可以诱发多种感染性疾病,包括急性中耳炎、鼻窦炎、结膜炎以及社区获得性肺炎等。NTHi反复感染是囊肿性纤维化及慢性阻塞性肺疾病(COPD)病情恶化的重要原因。此外,NTHi还可感染流感患者,与流感病毒(Influenza virus)协同作用,诱发继发性细菌肺炎,导致病人死亡率骤升。目前唯一可用的针对b血清型流感嗜血杆菌的Hib结合疫苗对预防NTHi疾病作用不大,因此NTHi疫苗研发刻不容缓。诱导保护性抗体是当前NTHi疫苗研究的主要思路,但是NTHi菌株之间异质性极大,且细菌表面与宿主直接作用的分子极易发生改变,给候选疫苗抗原筛选工作带来极大的挑战。近期研究发现,T细胞能够识别同种属细菌的保守抗原,介导跨菌株保护作用,表明T细胞疫苗在控制家族多样性极高的细菌感染方面具有显著优势。本文旨在研究NTHi特异性T细胞反应特征及抗原识别特点,探讨开发T细胞疫苗的可行性,为NTHi疫苗研究提供新思路。方法:本研究通过建立小鼠NTHi肺部感染模型,分别对NTHi特异性免疫应答特征、抗体和T细胞抗原谱以及抗体和T细胞对同种异株细菌的交叉反应性进行分析。利用过继转移方法,评估特异性抗体及T细胞在抗NTHi感染中的作用。结合高通量毒力分子鉴定及生物信息学筛选结果选择候选T细胞抗原并进行体外筛选,评估候选T细胞抗原对NTHi感染的体内保护效果。深入探讨研发NTHi T细胞疫苗的可行性。结果:NTHi感染可引起肺部高水平Th17细胞反应。不同于抗体,NTHi特异性Th17细胞可识别同种异株细菌并介导跨菌株免疫保护作用。体外筛选得到NTHi特异性Th17细胞抗原免疫不仅可以保护单纯NTHi感染,还可抑制NTHi在流感病毒/NTHi共感染小鼠肺部的增殖,降低肺组织损伤。结论:免疫小鼠产生的Th17细胞能够识别同种异株细菌,提供跨菌株保护作用。因此,基于Th17细胞的疫苗可以提供广谱的保护作用,有望成为NTHi疫苗研究的新方向。