黑蒜提取液对S.aureus Trap蛋白诱导特异性免疫应答的影响

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金黄色葡萄球菌(S.aureus)是广泛存在于自然界中的条件致病菌,常引起人类感染和食物中毒,严重威胁着人类健康,特别是老年人、新生儿、术后患者、体弱多病人群等。随着抗生素治疗S.aureus感染的长期应用,耐药及多重耐药S.aureus菌株大量涌现,促使人们研究疫苗免疫接种来预防S.aureus感染。研究表明,S.aureus的RNAIII激活蛋白的靶蛋白(Target of RNAIII Activating Protein,Trap)高度保守,并具有良好的免疫原性,已成为S.aureus疫苗研究开发的重要候选蛋白,但其免疫效果仍不令人满意。因此,探索如何提高S.aureus疫苗接种后诱导更好的免疫保护效果具有重要的科学意义和应用价值。生蒜具有强大的免疫调节活性,但经咀嚼生蒜细胞破坏后蒜氨酸与蒜氨酸酶互相接触,产生具有强烈蒜臭味的大蒜素并长时间残留在口中,令人难以接受。而近年市场上新出现的黑蒜则口感好,酸甜可口,无蒜臭味,适于各种人群。并且,黑蒜较生蒜具有更强的抗氧化、抗炎、抑制癌细胞生长和转移、免疫调节等作用。但有关黑蒜对抗原诱导特异性免疫应答方面缺乏研究。本研究用黑蒜提取液灌服BALB/c小鼠,然后再用S.aureus Trap抗原免疫接种小鼠,研究黑蒜提取液对抗原诱导机体特异性免疫应答的影响,旨在探索进一步提高S.aureus疫苗免疫保护作用。实验将180只6-8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为黑蒜高剂量组、黑蒜低剂量组、生蒜高剂量组、生蒜低剂量组、Trap组、PBS组。连续灌胃给药28天,将S.aureus Trap蛋白与完全弗氏佐剂以1:1乳化后经腿部肌肉注射,初免接种后2周以不完全弗氏佐剂与Trap蛋白乳化后加强免疫。加强免疫接种后1周,收集小鼠脾淋巴细胞,用Trap蛋白体外刺激,检测淋巴细胞增殖及其分泌的细胞因子水平。加强免疫接种后2周采集血清,用间接ELISA法检测小鼠血清特异性IgG及抗体亚类,并用S.aureus Newman菌株攻毒。结果,黑蒜高剂量组、黑蒜低剂量组、PBS组免疫血清OD450和IgG2a OD450平均值分别为1.754、1.520、1.300和0.428、0.360、0.346,IFN-γ和IL-17a分泌量分别为249.4pg/mL、210.6pg/mL、170.2pg/mL和268.8pg/mL、247.0pg/mL、195.8pg/mL,金黄色葡萄球菌Newman菌株功毒2周后黑蒜高剂量组、黑蒜低剂量组、PBS组小鼠存活率分别为70%、60%、50%。说明黑蒜高剂量组和低剂量组能显著提高血清抗Trap IgG和IgG2a水平,上调IFN-γ、IL-17a分泌水平,促进淋巴细胞增殖,提高攻毒保护率,且明显优于其它各组。结论,黑蒜提取液能够促进S.aureus Trap蛋白诱导的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,并诱导小鼠产生更强的抗S.aureus感染的免疫保护作用。该研究为进一步提高S.aureus疫苗接种诱导的免疫保护效果提供参考,也为提升黑蒜的实际应用提供依据。
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