L-arginine促进骨质疏松性骨折愈合的实验研究

来源 :四川大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongLIXUAN
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目的 观察骨质疏松性骨折愈合的病理特点,研究L-arginine对骨质疏松性骨折愈合的影响,并探讨其作用机制。 方法 1.采用酶消化法分离培养得到大鼠成骨细胞,经鉴定证实为成骨细胞后,在其培养液中加入不同浓度的L-arginine和PTH后,应用MTT法测定成骨细胞增殖率的变化,蛋白印迹分析成骨细胞OPG蛋白的表达情况,免疫组化法分析对成骨细胞中eNOS及iNOS的影响。 2.采用骨髓诱导法分离培养得到大鼠破骨细胞,经鉴定证实为破骨细胞后,在其培养液中加入不同浓度的L-arginine后,相差显微镜观察连续观察破骨细胞数目和形态的变化,将TRAP染色后的细胞进行TRAP阳性细胞观察与计数,并对骨磨片上的骨吸收陷窝进行定量分析。 3.应用去卵巢低钙饮食大鼠于术后3个月证实发生骨质疏松后,于左侧股骨中段制作骨质疏松性骨折模型,分别于术后1周,2周,4周,8周和12周,X线观察骨折愈合大体情况,双能X线骨密度仪检测左侧股骨BMD的变化,组织学检测骨质疏松性骨折愈合情况,应用免疫组化法测定骨折愈合过程中eNOS及iNOS的表达,检测血清生化指标的变化,并均与正常骨折愈合过程进行对照。 4.对骨质疏松性骨折模型大鼠分别给予12周的不同药物:L-arginine,易维特,rhPTH1-34,密钙息,福善美,同时给予骨质疏松模
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