目的通过研究相关信号传导通路中的关键分子,如受体TPK,立早基因c-fos基因,细胞周期相关激酶等在细胞和分子水平探讨鹿茸多肽促进软骨细胞增殖的机制,为鹿茸多肽在软骨损伤组织工程修复应用提供实验依据。有利于更好的开发利用该药。研究结果可对软骨细胞增殖相关细胞信号途径进行验证。方法1以胰酶胶原酶消化法获取兔软骨细胞进行培养。2采用相差显微镜观察其生长情况,MTT法描绘生长曲线。3以不同浓度的鹿茸多肽(PAP)刺激软骨细胞增殖,48小时后用MTT法观察细胞增殖情况。4再将实验细胞分成空白对照组,鹿茸多肽组,酪氨酸受体激酶阻断剂Genistein与PAP共同刺激的软骨细胞组和单纯Genistein组。用MTT法和流式细胞仪观察Genistein对PAP增殖情况及生长周期的影响。用免疫组化SABC法检测细胞周期蛋白cyclinA在PAP作用下的表达变化。RT-PCR法检测原癌基因c-fos mRNA表达。结果PAP作用下c-fos mRNA与cyclinA表达增加,S期的细胞比例增高,明显的促进软骨细胞增殖。Genistein作用后PAP的促增殖作用受到明显的抑制。结论鹿茸多肽可能通过酪氨酸受体蛋白激酶介导,作用下游的信号,引发立早基因c-fos表达,促进cyclinA的表达,引起更多的细胞进入有丝分裂期,从而促进软骨细胞增殖。鹿茸多肽在软骨修复组织工程中有较好的应用前景。