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目的：非剥脱性激光嫩肤技术可诱导真皮胶原重建，在光老化的治疗等方面越来越受到广泛关注。Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光是临床上常用的两种非剥脱性激光嫩肤技术。目前非剥脱性激光真皮胶原重建的机制尚不明确，多数学者认为是激光诱导真皮损伤而启动了机体的创伤修复反应。正常创伤修复反应是一个复杂的生物学过程，其中有许多细胞及介质参与。研究表明肥大细胞、神经肽P物质(SP)及其特异性受体神经激肽受体1(NK-1R)参与创伤愈合过程。本研究的目的是定量地评价和比较Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光诱导真皮创伤修复过程中Ⅰ型、Ⅲ型胶原、肥大细胞、成纤维细胞、SP和NK-1R mRNA表达的变化，以揭示非剥脱性激光真皮胶原重建的作用机制。
材料和方法：应用Q开关1064nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光分别对36只雌性昆明小鼠左侧后背头、尾侧皮肤进行连续4次治疗，每次间隔1周，右侧相应的部位作为自身对照。分别于第1次治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天对小鼠皮肤行活组织取材。应用甲苯胺蓝特殊染色、HE染色、免疫组化、原位杂交方法分别对皮肤组织样品真皮肥大细胞、成纤维细胞、Ⅰ型、Ⅲ型胶原、SP和NK-1R mRNA进行检测。免疫组化、原位杂交方法检测的切片中DAB阳性染色结果应用Motic医学数字图像分析系统进行定量分析。所测的数据以均数±标准差(-x+-s)表示，应用SPSS15.0软件对数据进行单因素方差分析(ANOVA)，不同变量间的相关性检验应用Pearson相关分析，P＜0.05认为有统计学意义。
结果：Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组：激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1天、7天、21天和30天，激光治疗组真皮肥大细胞总数较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05、P＜0.05)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮成纤维细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显降低，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，激光治疗后7天、21天和30天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平均较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01)。长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组：激光治疗后21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天和30天，激光治疗组真皮肥大细胞总数较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较正常对照组均明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮成纤维细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显降低，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平均较正常对照组明显升高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)。Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组与长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组的比较：激光治疗后7天、21天和30天，Q开关1064nmNd：YAG激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较长脉宽1064nm Nd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，而在激光治疗后60天长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05)；激光治疗后7天和21天，Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01)；激光治疗后1小时和7天，长脉宽1064nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮肥大细胞总数明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较Q开关1064 nmNd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天和21天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮成纤维细胞数量明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05)，而激光治疗后60天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮成纤维细胞数量明显降低，差异有统计学意义(p<0.05)；激光治疗后1小时，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮SP表达水平明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；激光治疗后1小时，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05)，而激光治疗后7天和21天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05)。不同检测指标间相关性分析结果：真皮脱颗粒的肥大细胞数量与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.732，P＜0.01)；真皮脱颗粒的肥大细胞数量与真皮Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.654，P＜0.01；r=0.671，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.629，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮脱颗粒的肥大细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.537，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮Ⅰ型及Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.578，P＜0.01；r=0.707，P＜0.01)，真皮SP表达水平与真皮Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原的比例呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.696，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.674，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.579，P＜0.01；r=0.672，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原的比例呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.641，P＜0.01)。
结论：非剥脱性激光嫩肤技术可诱导真皮肥大细胞、SP和NK-1R mRNA表达的变化，伴随着真皮成纤维细胞增生和胶原重建，尽管Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光的作用效果不同。我们的研究提示肥大细胞、SP和NK-1R可能参与非剥脱性激光诱导的炎症反应、成纤维细胞增生和真皮胶原重建。