日粮硒与维生素E缺乏对雏鸡胰腺中硒蛋白基因表达的影响

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangxinquan911
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硒在胰腺正常功能维持方面发挥重要作用,且胰腺是鸡硒缺乏最敏感的器官,缺硒可引起胰腺变性、坏死、萎缩和纤维化,但其生物学机制尚不清楚。研究发现硒和VE在一些功能上存在互作,在日粮缺硒基础上再缺VE会加重动物缺乏症的病理症状。以鸡为研究材料,研究缺硒和VE对雏鸡生产性能,生理生化指标、胰腺形态、细胞组织结构及胰腺硒蛋白基因表达的影响,可为探明硒和VE在胰腺功能维持中所发挥作用的生物学机制提供线索,同时研究结果也可望为当今困扰人类健康的重大疾病(如糖尿病、胰腺癌)的致病机理研究提供有益参考。本实验采用四川严重缺硒地区(汉源山区)生长的大豆、玉米为原料,并通过原料加工处理,配制低硒低VE日粮,来研究硒及VE缺乏对雏鸡胰腺硒蛋白基因表达的影响。实验设计采用2×2因子,将240只一日龄AA肉鸡随机分成4个处理组(n=60),分别饲以低硒低VE日粮(Se 0.014 mg/kg, VE 8.02 mg/kg)、低硒日粮(添加Se 0mg/kg, VE 50 mg/kg)、低VE日粮(Se 0.3 mg/kg, VE 0 mg/kg)、对照日粮(Se 0.3 mg/kg, VE 50 mg/kg),试验期4周,期间观察雏鸡临床症状,测定生长性能,于28 d每个处理选取5只鸡屠宰采集血液及胰腺组织样品用于硒、VE含量测定,胰腺病理切片制作,胰腺中,硒蛋白基囚RT-qPCR检测等。实验结果如下:1、硒及VE缺乏导致雏鸡21d即出现渗出性素质、运动障碍、腹泻等症状;剖检可见腹部有胶冻状黄绿色积液(发病率93%),胸、腿部肌肉均出现不同程度的出血点(发病率73.3%)等。低硒组也出现上述症状但发病程度及发病率与低硒低VE组相比要低一些,低VE组与对照组表现正常。2、剖检可见低硒低VE组雏鸡胰腺厚度变薄、宽度变窄、体积变小(发病率13.3%),其余组无变化。未添加硒组(低硒低VE组、低硒组)与添加硒组(低VE组、对照组)相比,雏鸡胰腺长度显著缩短(P<0.05)。低硒低VE组与对照组相比,胰腺脏器指数显著降低(P<0.05),其余各组间无差异。病理切片显示低硒低VE组在23d雏鸡胰腺细胞结构出现变化,至28 d腺泡结构变得紊乱,出现较多空泡;低硒组28d可见少量空泡,低VE组、对照组未见异常。3、日粮缺硒(低硒低VE、低硒组)显著降低血浆与胰腺中硒的含量(P<0.05),同时VE缺乏也影响硒在胰腺中的沉积,低VE组与对照组相比降低9%(P<0.05);添加VE组(低硒组、对照组)血浆中VE水平显著高于不添加VE组(低硒低VE、低VE组)(P<0.05)。4、从1 wk至4 wk对照组雏鸡平均体重均显著高于其余三组(P<0.05)。低硒低VE组3 wk、4 wk雏鸡平均日采食量与对照组相比显著降低(P<0.05),低硒组只在3 wk时显著降低(P<0.05),低VE组无差异,低硒低VE组、低硒组、低VE组三组间无差异。5、定量结果显示:①与对对照组相比,低硒低VE组、低硒组、低VE组中15个硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、TR1、TR2、TR3、Sepw1、Sepp1、Selo、Sels、Selt、Sepx1、Seli、Sepn1、Sep15、Selk)均下调表达,说明硒及VE影响胰腺中硒蛋白基因的表达。②硒及维生素E对10个硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、Sepw1、Sepp1、Selo、Sels、Selt、Sepx1、Seli、TR2)表达量存在交互效应(P<0.05),其中在低硒水平下添加VE对6个硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、Sepw1、Selo、Sepx1、TR2)影响显著(P<0.05);在正常硒水平下添加VE对9个硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、Sepw1、Sepp1、Selo、Sels、Sell、Sepx1、Seli、TR2)影响显著(P<0.05);在低VE的水平下添加硒对5个硒蛋白基因(Gpx4、Sepw1、Sepp1、Sepx1、TR2)影响显著(P<0.05);在正常VE水平下添加硒对9个硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、Sepw1、Sepp1、Selo、Selt、Sepx1、Seli、TR2)影响显著(P<0.05)。③维生素E对硒蛋白基因TR1、Sepn1、Sep15表达主效应极显著(P<0.01),与对照组相比其余三组表达量存在不同程度下调。④硒对硒蛋白基因R1、Selk表达主效应极显著(P<0.01),与对照组相比其余三个实验组表达量存在不同程度下调。⑤低硒低VE组硒蛋白基因Gpx1、TR2与低硒组、低VE组相比显著上调(P<0.01)。结论:日粮硒和维生素E缺乏严重影响雏鸡生长性能。硒水平为0.014 mg/kg时导致雏鸡胰腺病变,添加50mg/kg的维生素E,可以延迟出现胰腺病变的时间,但并不能完全阻止胰腺病变的出现。RT-qPCR结果显示:在硒缺乏情况下(Se0.014mg/kg)胰腺硒蛋白基因(Gpx1、Gpx4、TR1、TR2、TR3、Sepw1、Sepp1、Selo、Sels、Selt、Sepx1、Seli、Sepn1、Sepl5、Selk)均下调表达,预示这这些基因在胰腺正常功能维持中起着重要作用。
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