微丝骨架在小麦与黄瓜白粉菌、条锈菌互作中作用的研究

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本研究以小麦-黄瓜白粉菌(非寄主)和小麦品种水源11-小麦条锈菌CY23(非亲和)互作体系为研究对象,用微丝解聚药物细胞松弛素A(Cytochalasin A,CA)注射小麦叶片后再行接种,于不同时间点取样,对两种互作体系的组织学特征进行了研究。利用台盼蓝,二氨基联苯胺(DAB)和考马斯亮蓝染色法观察了CA处理及注水对照中过敏性坏死反应(HR),过氧化氢(H2O2)和乳突的产生情况及区别,以检测微丝骨架的状态对植物抗病反应的影响。通过研究取得了以下结果:1.采用透明染色法观察了黄瓜白粉菌在寄主(黄瓜)和非寄主(小麦)上的萌发侵染情况,及CA处理对黄瓜白粉菌侵染过程的影响。结果表明,与寄主相比,黄瓜白粉菌孢子在小麦叶片上萌发相对滞后,附着胞形成率降低,且多为畸形附着胞,不能形成次生菌丝。但经CA处理后,黄瓜白粉菌可以侵入小麦表皮细胞并形成吸器,甚至可以形成次生菌丝。说明微丝骨架的状态与非寄主抗性密切相关。2.给小麦叶片注射CA后接种黄瓜白粉菌,利用台盼蓝染色法观察了HR的发生情况。结果表明在CA处理和注水对照中,HR的发生比例及程度均随时间延长不断增加。CA处理后,坏死细胞比例增加的幅度及坏死程度均小于注水对照。说明微丝骨架参与了过敏性坏死反应的表达。3.给小麦叶片注射CA后接种黄瓜白粉菌,利用DAB染色法观察了H2O2的产生情况。结果表明,小麦微丝骨架的解聚在很大程度上抑制了白粉菌诱导的H2O2的产生。说明微丝骨架与小麦非寄主抗性中H2O2的积累有关。4.采用考马斯亮蓝染色法,检测了CA处理对黄瓜白粉菌诱导的乳突形成情况的影响。结果表明,随着时间的延长,CA处理及注水对照的乳突形成率均逐渐升高。但CA处理后乳突形成率增加的幅度及乳突体积均明显小于对照。说明了微丝的解聚对乳突的形成是有影响的。5.用伊文思蓝染色法和荧光染色法研究了CA处理对条锈菌诱导的小麦细胞HR的影响。结果表明小麦叶肉细胞微丝骨架的解聚使过敏性坏死反应受到了很大程度的抑制。表明微丝骨架参与了小麦抗条锈反应,微丝的聚合是HR反应所必须的。6.用DAB染色法研究了CA处理对条锈菌诱导的H2O2产生情况的影响。结果显示在整个侵染过程中,H2O2的变化趋势在CA处理和注水对照中是相同的,但CA处理后DAB染色细胞的比例变化的幅度及染色程度均明显小于对照。表明小麦抗病防卫反应中H2O2的积累与微丝骨架的聚合状态有关。
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