肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其生理品质的影响

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以番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)为供试菌,用肉桂醛对灰葡萄孢菌进行处理,在离体条件下观察灰葡萄孢菌菌丝生长和孢子萌发的情况,并通过对肉桂醛处理后灰葡萄孢菌的细胞膜渗透率和菌丝浸提液中可溶性糖、可溶性蛋白含量的测定,初步探究其抑菌机理;通过调查肉桂醛浸泡处理活体接种的番茄果实发病情况及番茄果实中抗病相关酶活性和相关物质的含量测定,探究肉桂醛对番茄灰霉病的防治效果,及其诱导抗病性的机理;研究通过肉桂醛浸泡处理的番茄果实贮藏期间发病情况及其生理营养品质的变化。研究结果如下:1、以灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的分生孢子和菌丝为研究对象,在离体条件下配制10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL和60μg/mL的肉桂醛带毒PDA培养基进行无菌孢子涂布试验,发现肉桂醛对灰葡萄孢菌的孢子萌发具有较好的抑制效果,肉桂醛浓度与孢子萌发率呈显著负相关,其对孢子萌发的EC50值为31.956μg/mL,浓度越高对孢子萌发的抑制效果越好,在浓度为60μg/mL时对孢子萌发抑制率达100%。显微镜下观察孢子萌发形态发现处理组孢子芽管粗短或没有,芽管壁粗糙,孢子萌发迟缓;而对照组孢子萌发迅速,芽管细长,芽管壁光滑。用50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL和200μg/mL的带毒PDA培养基对灰葡萄孢菌的菌丝进行离体培养发现,肉桂醛对菌丝生长的抑制中浓度为95.596μg/mL,肉桂醛浓度越高,对菌落直径扩展的抑制效果越好,到200μg/mL时能够完全抑制菌丝生长。对灰葡萄孢菌的菌落形态进行观察发现,高浓度肉桂醛处理的灰葡萄孢菌的菌丝较对照稀少,所产生色素积累较对照深,且菌丝生长分布不均匀,向中间聚拢生长。在显微镜下观察,处理组菌丝表面较对照粗糙,产生内容物凝集,原生质体渗漏,菌丝空泡化,发黑萎缩的现象。在浓度分别为50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL和200μg/mL的肉桂醛药液中对灰葡萄孢菌的菌丝进行摇床培养发现,在培养160min后,200μg/mL肉桂醛处理细胞膜的渗透率最高,达到61.2%,而对照组仅为14%;其菌丝浸提液中可溶性蛋白和可溶性糖的含量极显著高于对照组(P<0.01),说明肉桂醛处理能够破坏灰葡萄孢菌菌丝细胞膜的选择渗透性,从而致使细胞内营养物质的渗漏,使得细胞内外电解质失衡,从而抑制菌丝的生长。2、肉桂醛能够抑制人工接种灰葡萄孢菌的番茄果实的发病情况,抑制病斑直径,降低发病率。在接种第5d对照组和1000μg/mL处理的番茄果实已全部发病,2000μg/mL发病率为32.1%,4000μg/mL仅为11.3%。以4000μg/mL肉桂醛处理的番茄果实分别在24h、48h、72h、96h和120h进行间隔损伤接种,发现在96h时番茄果实病斑直径最小,说明肉桂醛能够诱导番茄果实的抗病性,且持续时间为96h。以仅刺伤、刺伤+接种和刺伤+接种+肉桂醛为处理,不刺伤不接种为空白对照,测定果实中POD、PPO、PAL活性和总酚类黄酮含量变化,发现刺伤+接种+肉桂醛处理组三种酶的活性最高,在达到高峰时其活性分别为2.40U/g FW、2.69U/g FW和4.25U/g FW,而对照组分别为0.82U/g FW、1.76U/gFW和3.09U/g FW,说明肉桂醛能够通过提高番茄果实中抗病相关酶的活性和抗病物质总酚和类黄酮的含量来提高果实的抗病性。3、探究了肉桂醛处理自然发病的番茄果实在贮藏期间发病情况和生理生化品质的变化,发现肉桂醛能够明显抑制番茄果实贮藏期间的发病率,减少病情指数。4000μg/mL、2000μg/mL和1000μg/mL肉桂醛处理的番茄果实贮藏第15d发病率分别为8.3%、30.7%和89.3%,此时对照组已100%发病;病情指数分别为14、26和33,对照组高达56。4000μg/mL肉桂醛处理能够明显抑制番茄果实的失重,到第15d失重率仅为0.5%,而对照组高达4%;其硬度是对照组的4.3倍;可溶性固形物、可滴定酸和维生素C含量分别是对照组的1.7倍、2.6倍和1.9倍,因此4000μg/mL是番茄果实采后贮藏保鲜的最佳处理浓度,在此浓度下其能够维持番茄果实贮藏过程中的生理生化品质,最大地实现其营养价值和商品价值。
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