解磷真菌的筛选鉴定及其菌肥的研制与应用

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针对我国中低品位磷矿资源利用率低,大部分耕地土壤缺磷,传统化肥利用率低且容易固化,耕地土壤生态环境受到破坏这一系列问题,找到一种低成本、环保绿色、可持续利用的新型肥料迫在眉睫。解磷菌肥一方面能够提高低品位磷矿粉和传统磷肥的利用率,降低成本,另一方面能够将土壤中固化的磷解离出来,改善土壤环境,绿色环保。研制出一种新型解磷菌肥能够在一定程度上缓解这些问题。本实验从多个地区的土壤样品中筛选出三株解磷效果较好的解磷真菌JL7、JL17、JL32。三株解磷真菌在无机磷液体培养基中的解磷量分别可以达到:264.13mg/L、214.37mg/L、243.43mg/L。对三株真菌的菌落形态和显微形态特征进行观测,对其分子生物学和生理生化方面进行鉴定。结果表明JL7、JL17、JL32三株真菌分别为烟曲霉菌,厚垣孢链格孢菌和产黄青霉菌。通过单因素实验和正交实验对三株真菌解离低品位磷矿的最佳条件进行探究,在最佳条件下测得三株真菌的最高解磷量分别为967.4mg/kg、814.5mg/kg、857.9mg/kg。用JL7、JL17、JL32三株真菌制成的真菌菌肥和三株真菌解离磷矿粉制成的混合肥料进行烟草盆栽实验,测得菌肥与混合肥对烟苗的生长都有明显的促进作用。土壤P、K、N含量都有所提升,菌肥对土壤P、K、N含量的提升分别为:10.7%~26.3%、2.6%~10.3%、6.9%~15.8%;混合肥对土壤P、K、N含量的提升分别为:25.4%~51.3%、1.8%~5.9%、5.2%~9.6%。同时菌肥与混合肥还能降低土壤p H。通过对解离前后磷矿表面形貌变化、解磷量与p H变化的关系、有机酸的种类、磷酸酶的活性等方面进行测定,探究了真菌解离低品位磷矿的机理。用扫描电子显微镜对真菌解离前后磷矿粉的表面形貌进行观测,发现解离前磷矿粉表面粗糙程度低,结构致密;解离后粗糙程度大大增加,表面结构被破坏,变得疏松,产生许多孔隙。JL7、JL17、JL32三株真菌解离液中的p H最低分别降到2.9、4.1、3.0,解磷量与p H呈负相关,相关系数分别为-0.819、-0.619、-0.620。用HPLC法测得三株真菌分泌的有机酸种类包括:草酸、乙酸、富马酸、丙酸。用磷酸苯二钠比色法测得JL7、JL17、JL32三株真菌解离液中酸性和中性磷酸酶活性分别为83.95mg/L和25.49mg/L;427.28mg/L和156.24mg/L;296.84mg/L和86.96mg/L。
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