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卒中是威胁人类健康的三大疾病之一,缺血性卒中占卒中总数的55%～80%,具有高度的致残率和死亡率。脑缺血再灌注损伤是缺血性卒中发生发展的主要病理机制。脑缺血再灌注后可引发神经-内分泌-免疫网络(NEI)调控功能紊乱,使血浆、海马糖皮质激素(GCS)含量异常增高,加重脑缺血再灌注后病理性损伤。新近研究结果显示脑缺血再灌注后高 GCS是促神经细胞凋亡重要的病理因素之一,而海马等与认知功能相关重要脑区神经细胞的凋亡是卒中后血管性痴呆发病的病理基础。目前对高GCS促使神经细胞凋亡的病理机制尚不十分清楚。补肾活血化痰中药健脑安是导师治疗血管性痴呆的临床经验方。前期实验研究证实健脑安可调节脑缺血再灌注后神经内分泌免疫网络相关基因的IL-1、CRF表达,降低脑缺血再灌注后神经细胞损伤。本实验通过放射免疫测定、免疫组化、原位杂交和TUNEL等实验方法,探讨脑缺血再灌注后高糖皮质激素促海马神经细胞凋亡的作用,并在此基础上着重观察了中药健脑安对高糖皮质激素促海马神经细胞凋亡作用的影响,进一步从神经内分泌角度来揭示健脑安对脑缺血再灌注后神经细胞的保护作用,及其潜在的防治卒中后痴呆的药理机制。 实验结果显示,健脑安治疗组在脑缺血再灌注后2h、6h、12h和24h四个时点的血浆、海马皮质醇(COR)含量均较模型组低,统计学分析结果差异显著(P<0.05)。TUNEL 结果表明再灌注各时点治疗组、GCS 拮抗剂组的阳性细胞数均较模型组少,再灌注 12h 上述两组阳性细胞数与模型组相比差异显著(P<0.01)。拮抗剂和健脑安均可一定程度下调线粒体依赖途径中关键环节基因NMDAR、细胞色素C和Caspase3 的蛋白表达,及细胞色素C和Caspase3的 mRNA 表达。治疗组和拮抗剂组各基因蛋白、mRNA 表达与模型组相比差异显著(P<0.05～P<0.01)。健脑安对糖皮质激素受体(GR)表达无影响,与模型组相比无统计学意义。本实验证实脑缺血再灌注后高GCS可通过线粒体依赖细胞凋亡途径促使海马神经细胞凋亡。而补肾活血化痰功效的健脑安可通过选择性地降低脑缺血再灌注后的GCS含量,抑制高GCS对线粒体依赖凋亡途径激活,从而降低脑缺血再灌注后的海马神经细胞凋亡。这一作用可能是健脑安保护脑缺血再灌注后神经细胞的机制之一。同时调节脑缺血再灌注后神经内分泌免疫网络功能的紊乱,可能是补肾活血化痰法保护神经细胞,防治血管性痴呆的一个重要的生物学基础。