随着我国畜牧业的发展,蛋白原料的匮乏及不断增加的成本已严重制约养殖业的发展。苹果渣作为陕西重要的非常规饲料原料,对其饲料化利用具有重要的社会和经济效益。但苹果渣中较低的蛋白含量,较高的抗营养因子等,限制其应用效果,而微生物发酵为其利用提供了重要途径。本文通过液态发酵产酶试验和苹果渣固态发酵试验,研究供试菌株的产酶特性及其对苹果渣发酵改质效果;以优良霉菌为出发菌株,优化苹果渣两步固态发酵工艺,依托此工艺开展中试生产效果研究;并对苹果渣生物活性蛋白饲料喂养效果进行了系统地评价。本研究为苹果渣发酵饲料的生产提供了优良发酵菌株,所建立的两步法发酵工艺及发酵饲料生物评价为其广泛的生产和应用提供了科学的技术支持和指导。主要结论如下:1.获得3株产复合酶活较高的丝状真菌,分别是霉菌MHQ1、霉菌MMQ1和霉菌MYQ1,经鉴定:菌株MHQ1为黑曲霉,菌株MMQ1为米曲霉,菌株MYQ1为烟曲霉。其中黑曲霉MHQ1产纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶活性较高,分别为64.67 U/ml、66.91U/ml、216.70 U/ml;米曲霉MMQ1产淀粉酶和蛋白酶活性较高,分别为1782.65 U/ml、83.04 U/ml;烟曲霉MYQ1产蛋白酶和果胶酶活性较高,分别为128.90 U/ml、51.56 U/ml。2.霉菌和酵母菌复合固态发酵苹果渣能显著提高产物中蛋白质含量,并从中筛选出3株在果渣基质中生长良好的霉菌菌株黑曲霉MHQ1、黑曲霉A8和黑曲霉MHQ4。其与产朊假丝酵母配伍能形成优良复合菌剂,发酵苹果渣后,产物中粗蛋白含量分别达到387.49 g/kg、384.72 g/kg和339.46 g/kg,接菌增率为79.2%、78%和57%;其纯蛋白含量分别为228.94 g/kg、200.06 g/kg和203.70 g/kg,接菌增率为187.5%、151.3%和155.8%。3.中试生产表明由黑曲霉、产朊假丝酵母、乳酸菌和芽孢菌组成的复合菌剂能有效改质果渣为生物活性蛋白饲料。在两步发酵中,真菌发酵两天后接入乳酸菌和芽孢菌,发酵进入第五天前结束发酵,能较好地保持产物中益生菌活性,提高发酵效率。苹果渣生物活性蛋白饲料干燥后酵母菌、芽孢菌和乳酸菌的数量分别为4.47×107cfu/g、6.73×107cfu/g和1.27×108 cfu/g;水溶性蛋白和多肽的含量分别为1.80 g/kg、0.467 g/kg,发酵增率分别为1118.2%、522.4%;水溶性还原糖和氨基酸的含量分别为46.03 g/kg、17.74 g/kg,发酵增率为43.9%、472.1%,接菌增率150.2%、94.9%。4.苹果渣生物活性蛋白饲料能显著提高仔猪的生产性能,增加机体对饲料的消化利用率,提升机体激素的分泌能力,减少肠道病原菌数量,改善肠道微生态环境,抑制腹泻现象。仔猪日粮中添加6%的苹果渣生物发酵饲料喂养效果最好,整个饲养阶段与对照相比,仔猪的体重增加3.16%,日增重增加4.90%,采食量增加2.45%,料肉比降低2.74%,血液中激素水平显著提升,尿素氮和胆固醇含量显著降低,表明仔猪蛋白合成和代谢能力增强。同时,肠道总菌群数显著增加,大肠杆菌数显著降低,腹泻率较对照下降33.33%。