The Effect of Neovascularization on Human Retinal Pigment Epithelium after Hyperbaric Oxygen Therapy

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目的:  通过体外培养人视网膜色素上皮细胞,观察高压氧(Hyperbaric oxygen,HBO)治疗对正常和缺氧状态视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelium,RPE)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。  方法:  体外培养人视网膜色素上皮细胞ARPE-19,随机分成对照组(正常对照组用DMEM/F12培养液,缺氧对照组用含浓度为200μmol/L CoC12的DMEM/F12培养液)和实验组(0.15MPa高压氧处理组,0.2MPa高压氧处理组,0.25MPa高压氧处理组,缺氧+0.15MPa高压氧处理组,缺氧+0.2MPa高压氧处理组,缺氧+0.25MPa高压氧处理组)。各实验组100%纯氧下暴露60和90min,每隔24h暴露一次,共暴露2次.以蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中的PEDF及TNF-α表达情况。  结果:  Western Blot法显示:①缺氧组与正常组在HBO干预后(0.15MPa组、0.20MPa组、0.25MPa组在所有观察时间(60min、90min)),细胞内PEDF表达量增加(P<0.01),正常组的表达量与缺氧组相比明显较高,各组PEDF表达量与HBO干预时间无统计意义;②正常组与缺氧组在HBO干预后(0.15MPa组、0.20MPa组、0.25MPa组在所有观察时间(60min、90min)),细胞内TNF-α表达量均减少(P<0.01),缺氧组的表达量与正常组相比明显较高,各组TNF-α表达量与HBO干预时间无统计意义。  结论:  1)高压氧治疗可以促进正常状态以及缺氧状态下RPE细胞释放PEDF;  2)高压氧治疗会抑制正常状态以及缺氧状态下RPE细胞释放TNF-α,这种抑制作用在缺氧状态下更为显著;  3)高压氧治疗可以升高PEDF水平,降低TNF-α水平,具有抗血管生成作用,从而可以抑制新生血管生成。
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