四川省部分地区公猪精液六种病毒性疾病的分子检测

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猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和日本脑炎病毒(JEV)是6种常见的猪传染病病原,均可引起猪群的繁殖障碍性疾病,给养猪业造成巨大经济损失。这些病毒不仅可在猪群间水平传播,也能通过种公猪精液与母猪胎盘屏障垂直传播,从而造成胎儿感染。种公猪在感染上述病毒后,通常不表现明显的临床症状,但可在其精液中检测出病原。人工授精技术在我国的推广也使得疫病经精液传播的风险大大提高。所以公猪的健康及其精液的品质安全对规模化猪场疾病的防控起着关键作用。本研究利用MEGA软件对GeneBank中公布的PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、 PPV、JEV6种病毒的基因序列进行分析比对。以各自病毒的保守序列为模板,利用primer premier 5.0程序分别设计一套引物,采用PCR或RT-PCR检测方法。对四川省多个地区送检的126份公猪精液进行病原检测,并根据检测结果进行流行病学调查,确定四川地区主要的公猪精液传播疾病,以期为精液病毒性疾病的诊断和防控提供理论支持。或RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、且方便快速,具有广阔的应用前景。检测结果:由四川雅安、蒲江、邛崃、眉山、遂宁、绵阳6个市(县)的10家猪场送检的126份公猪精液样品中,共检出有27份样品阳性带毒,带毒率达21.43%。其中检出15份样品为PRRSV阳性,阳性率为11.90%;4份为CSFV阳性,阳性率为3.17%,主要发生于绵阳和雅安地区;4份为PRV阳性,阳性率为3.17%,来自邛崃和眉山的送检猪场;3份为PCV-2阳性,阳性率为2.38%,发生于蒲江和绵阳地区;1份为PPV阳性,发生于邛崃送检猪场。所有送检病料中,未检出有JEV。另外,检出的15份PRRSV阳性病料中,高致病性变异株(nsp2缺失株)为14份,阳性率达93.33%,而PRRSV经典株(nsp2非缺失株)仅有1份。此外,部分送检样品中还出现了不同程度的混合感染情况。其中蒲江某种猪场出现2例PRRSV与PCV-2的混合感染,阳性率1.59%;绵阳某猪场测出1份精液有PRRSV与CSFV的混合感染,阳性率为0.79%;该猪场还出现PRRSV、CSFV、PCV-2三重感染1例,阳性率为0.79%。此外,眉山某猪场送检样品中测出1例有PRRSV与PRV的混合感染,阳性率0.79%。由此可见,不同区域的公猪精液内病毒流行情况差异较大,不同猪场的公猪带毒情况也有所不同。不同程度的混合感染也使得猪场疫病的流行状况十分复杂,对四川养猪业健康发展造成严重威胁。因此,我省兽医主管部门、种猪场及规模化猪场必须加强对种公猪的疫病监测力度,及时发现淘汰带毒猪,从源头切断传染源。
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