目的本研究旨在探讨GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用及其作用机制,了解其对卵巢癌细胞生长情况及对顺铂敏感性的影响,从而为卵巢癌的治疗提供新思路,为克服卵巢癌顺铂耐药提供新方法。方法本研究通过体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,以GRP78调节因子BAPTA-AM、A23187分别下调、上调卵巢癌细胞中GRP78表达,以RT-PCR、Western Blot蛋白印迹法分别检测SKOV3细胞中Beclin-1、Bcl-2、CHOP m RNA及其蛋白表达水平改变;以GFP-LC3-II荧光染色法观察细胞自噬水平变化;以Annexin V-FITC法检测肿瘤细胞凋亡变化,以明确GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用;以MTT法检测顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制率,了解GRP78对卵巢癌细胞生长情况及其对顺铂敏感性的影响。结果1.SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOP m RNA表达的影响经GRP78调节因子BAPTA-AM和A23187分别下调、上调SKOV3细胞中GRP78表达后,卵巢癌细胞SKOV3中Beclin1 m RNA的相对表达量分别为(0.8605±0.05478)、(0.6537±0.06500),与对照组相对表达量(0.7724±0.02871)相比,差异有统计学意义(t=2.768,P<0.05;t=2.893,P<0.05)。Bcl-2 m RNA的相对表达量分别为(0.7136±0.03230)、(0.9075±0.04730),与对照组相对表达量(0.8450±0.01785)相比,差异有统计学意义(t=3.334,P<0.05;t=3.920,P<0.05)。CHOP m RNA的相对表达量分别为(0.8108±0.00380)、(0.6195±0.06148),与对照组相对表达量(0.7116±0.07689)相比,差异有统计学意义(t=3.141,P<0.05;t=2.877,P<0.05)。2.SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOP蛋白表达的影响经GRP78调节因子BAPTA-AM和A23187分别下调、上调SKOV3细胞中GRP78表达后,卵巢癌细胞SKOV3中Beclin1蛋白的相对表达量分别为(0.9521±0.02238)、(0.6375±0.02489),与对照组相对表达量(0.7890±0.08349)相比,差异有统计学意义(t=3.268,P<0.05;t=3.012,P<0.05)。Bcl-2蛋白的相对表达量分别为(0.3854±0.03231)、(0.5956±0.02902),与对照组相对表达量(0.4918±0.03551)相比,差异有统计学意义(t=3.810,P<0.05;t=3.248,P<0.05)。CHOP蛋白的相对表达量分别为(0.6813±0.09462)、(0.4313±0.09534),与对照组相对表达量(0.5306±0.00110)相比,差异有统计学意义(t=3.404,P<0.05;t=3.222,P<0.05)。3.SKOV3细胞中GRP78对细胞自噬的影响经GRP78调节因子BAPTA-AM和A23187分别下调、上调SKOV3细胞中GRP78表达后,卵巢癌细胞SKOV3中自噬体荧光值分别为(706.25±117.258)、(473.17±127.903),与对照组荧光值(594.58±126.232)相比,差异有统计学意义(t=5.381,P<0.05;t=4.380,P<0.05)。4.流式细胞技术检测GRP78对SKOV3细胞凋亡的影响BAPTA-AM处理后,SKOV3细胞凋亡率为27.42%,对照组为19.57%,实验组与对照组相比凋亡率增加。而A23187处理后,SKOV3细胞凋亡率为12.21%,与对照组相比凋亡率降低。5.BAPTA-AM、A23187对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响SKOV3细胞的顺铂IC50为(3.02±0.624)μg/ml。经BAPTA-AM下调SKOV3细胞GRP78表达后,SKOV3细胞的顺铂IC50为(2.00±0.172)μg/ml,其对顺铂的敏感性增加了33.78%,与对照组相比差异有统计学意义(t=17.787,P<0.05)。而经A23187上调GRP78后,SKOV3细胞顺铂IC50为(4.91±2.515)μg/ml,对顺铂敏感性降低了62.58%,与对照组相比差异有统计学意义(t=29.516,P<0.05)。结论1.GRP78通过调节Beclin1、Bcl-2、CHOP等基因表达而影响卵巢癌SKOV3细胞自噬与细胞凋亡水平,进而影响卵巢癌顺铂敏感性,调节GRP78表达可能成为治疗卵巢癌、提高卵巢癌顺铂敏感性的新方法。2.GRP78可能通过调节肿瘤细胞自噬与细胞凋亡途径在卵巢癌顺铂耐药中发挥重要作用。