论文部分内容阅读
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化增殖潜能的原始细胞。叉头匡蛋白家族是细胞内一类非常重要的转录因子,参与了细胞的新陈代谢,发育,分化,增殖,凋亡等几乎所有的生理过程。本文以P19EC细胞作为研究体系,重点研究了Fox家族的两个重要成员FoxA1和FoxM1。为了研究FoxA1对干细胞多能性及分化潜能的影响,我们构建了能在P19细胞中稳定表达GFP-rFoxA1融合蛋白的细胞株。通过分析发现,P19 GFPFoxA1细胞株能正常表达多能性关键基因如Oct4, Nanog和Sox2,但是它也能表达神经干细胞标志基因Nestin和神经特异性基因TubulinβIII。同时,我们检测到细胞株的碱性磷酸酶的活性明显下降,而阶段特异性胚胎抗原SSEA-3和神经干细胞相关膜蛋白Prominin-1出现了高表达。这些暗示了细胞株呈现部分神经干细胞的特征。在RA诱导P19细胞分化的过程中,P19 GFPFoxA1细胞株在分化的早期就能看到多能性基因Nanog的迅速下调,而TubulinβIII在分化的早期增加的更快些,暗示FoxA1的高表达可能可以促使细胞更早地启动分化。所以我们认为在P19细胞中高表达FoxA1,可能会使P19细胞变成类似于神经干细胞的细胞。本文还通过构建P19 GFPFoxM1稳定细胞株来探究FoxM1与细胞多能性维持的关系。通过分析发现,在RA诱导的分化的过程中,FoxM1的稳定高表达使细胞不易形成胚胎小体,多能性关键基因如Oct4、Sox2也能更持久的维持表达,说明FoxM1可能对维持干细胞的多能性起重要作用。