餐饮废水高效降解蛋白菌株的分离筛选及诱变选育研究

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餐饮废水排放量大,污染严重,其处理逐渐成为城市生活污水处理的新重点。国内外,通过微生物发酵处理餐饮废水的技术逐渐兴起。本实验从采自屠宰场、豆制品加工厂、餐馆及学校餐厅下水道口的4个样品中分离筛选得到高效降解餐饮废水蛋白的菌株D-4,对该菌株的菌落形态、生理生化指标等方面进行了研究,初步鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。对D-4菌株的生长曲线研究显示:0~4h该菌生长处于迟缓期,4~28h为对数增长期,28h后进入稳定期;蛋白降解曲线研究发现:降解36h时,蛋白降解率已达到81.67%。以从自然界分离筛选出的B. megaterium D-4为出发原始菌株,利用紫外照射和离子束注入诱变进行复合诱变育种,在紫外诱变时,选择照射时间为4min(存活率为17.10%);低能离子注入时,选择能量30 keV,剂量6×1015·ion/cm2,存活率为13.40%。在该条件下对出发菌株进行复合诱变,通过初筛和复筛,选育出一株突变株D-4-29-3,其蛋白降解率比原始出发菌株D-4提高了18.20%,也大大缩短了生长周期和蛋白降解周期,经15次传代实验表明该菌株遗传稳定性良好。在菌株D-4-29-3降解条件的研究中,探讨了pH、温度、接种量、摇床转速、不同碳源及不同配比发酵培养基成分对蛋白降解率的影响。确定其降解蛋白的最优发酵培养基配比与降解的最佳工艺条件如下:蔗糖1.0%,酪蛋白1.0%,酵母膏0.2%,K2HPO4 0.3%;初始pH 7.0,种龄12h,接种量4.0%,温度32~37℃,摇床转速180 rpm/min,降解24h。在此条件下,其蛋白降解率最高可达97.56%。
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