MEHP、MBP联合染毒致小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤以及枸杞多糖对其保护作用的研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:swpixl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP和邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)联合染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM3)氧化损伤及枸杞多糖对细胞的保护作用。  方法:1、将小鼠睾丸间质细胞(TM3)在含10%胎牛血清浓度的DMEM高糖培养基条件下体外培养,用浓度为0(对照组)、1、10、100、500、1000umol/L不同浓度梯度的MEHP和MBP作用于小鼠睾丸间质细胞48h。2、以MTT法测定细胞活力以及MEHP和MBP对细胞的毒性作用。3、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)酶活力情况;用试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)含量。4、用试剂盒检测细胞线粒体内8-OHdG含量。5、用试剂盒检测细胞Caspase-3酶活力。6、Western blot检测细胞裂解液中Bax,Bcl-2的表达水平。  结果:1、MEHP和MBP联合染毒对TM3细胞的增殖抑制存在交互作用,使细胞存活率明显降低,表现为协同作用。2、MEHP和MBP单剂量染毒,随着染毒浓度的增加,细胞内的SOD水平明显降低;MEHP和MBP联合染毒组呈现协同作用。3、MEHP和MBP单剂量染毒,随着染毒浓度的增加,细胞内的MDA水平明显升高;MEHP和MBP联合染毒组呈现协同作用。4、荧光电镜结果显示,联合染毒组可见大部分细胞死亡,剩余细胞肿胀堆积、变暗,间隙更大。5、MEHP和MBP单剂量染毒,随着染毒浓度的增加,细胞内线粒体8-OHdG含量明显升高;MEHP和MBP联合染毒组呈现协同作用。6、MEHP和MBP联合染毒致细胞内Caspase-3活力增加,提示染毒诱导TM3细胞凋亡。7、细胞内蛋白水平Bax随着单剂量MEHP、MBP染毒浓度增加而增加;细胞内蛋白水平Bcl-2随着单剂量MEHP、MBP染毒浓度增加而降低。联合染毒组细胞与对照组比较,细胞内Bax蛋白水平增加,Bcl-2蛋白水平降低,显示细胞内促细胞凋亡的存在。而枸杞多糖保护组细胞凋亡与联合染毒组相比,细胞内Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平增加。  结论:MEHP和MBP联合染毒对小鼠睾丸间质细胞的增殖有抑制作用,造成小鼠睾丸间质细胞发生氧化应激反应,主要表现为脂质过氧化水平的增高,同时降低细胞抗氧化水平,促凋亡蛋白表达水平升高,抑凋亡蛋白表达水平降低,诱导细胞凋亡。枸杞多糖对细胞有一定的抗氧化应激保护作用。
其他文献
[目的]   本研究拟对建立一套适用于高等医学院校非直属附属医院教学质量评价指标体系进行探讨,为评价高等医学院校非直属附属医院教学质量提供参考。   [方法]   通