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目的：构建和筛选沉默FASN基因的最佳重组质粒，探讨下调FASN基因表达对人骨肉瘤细胞U2-OS细胞体外增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法：①根据NCBI查询到的FASN cDNA序列设计并合成靶向FASN的寡聚核苷酸序列，连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体中构建重组质粒（分别命名为X197-1、2、3、4）。重组质粒与脂质体2000共转染人骨肉瘤U2-OS细胞后，在倒置荧光显微镜下观察荧光率。RT-PCR和Western blot检测构建的重组质粒对FASN的mRNA及蛋白表达的影响。②优化的质粒转染条件，以优化转染条件（(plasmid: Lipofectamine2000=1:3)）转染人骨肉瘤细胞U2-OS，MTT法检测细胞增殖变化，划痕愈合和Transwell侵袭实验检测细胞侵袭、迁徙能力。结果：①成功构建质粒，其中质粒(X197-1、X197-2)转染U2-OS骨肉瘤细胞的荧光率大于50%。四质粒均能有效抑制FASN mRNA(53.2±4%、47.5±3%、41.9±5%、52.8±2)%及FASN蛋白的表达（抑制率：79.4%、47.3%、64.5%、64.2%）。同其他质粒相比，X197-1被筛为最佳质粒。②MTT法检测转染X197-1质粒的细胞在24h、48h、72h、96h的OD值分别为（0.1183±0.0408、0.1567±0.0476、0.3033±0.0121、0.4783±0.0107），明显低于阴性对照组和空白组(p＜0.05)。划痕愈合实验结果示转染X197-1质粒的细胞迁移率(13.7±8.7%)明显低于阴性对照组(74.8±4.5%)和空白组(77.6±6.4%)(p＜0.05)。Transwell侵实验结果显示转染X197-1质粒的细胞穿膜数(55±4.8)个明显少于少于阴性对照质粒组(135±7.4)个和空白组(146±6.7)个(p＜0.05)。这些数据表明构建的干扰质粒沉默FASN基因能显著的降低骨肉瘤细胞U2-OS的增殖、迁移和侵袭能力。结论：靶向FASN基因的重组干扰质粒构建成功。沉默FASN表达后能有效抑制人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞的增殖、侵袭和迁移，为下一步实验打下坚实的基础。