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目的： microRNA（miRNA）是类非编码的单链小RNA分子，长度为18-22个核苷酸，具有转录后调控基因表达的功能。研究表明，miRNA几乎在所有细胞的生物学过程包括代谢、生存、分化和凋亡中发挥着关键性的作用。特定miRNA的表达下调导致多种疾病，尤其是肿瘤的发生发展。我们及其他研究表明，在肝癌组织中miR-141表达明显下调，但其具体作用机制尚无报道，我们研究目的之拟对肝癌细胞Huh7迁移能力是否受miR-141的调控进行初步探讨，以期提供肝癌转移的新标向，具有重要的研究意义。HCV的慢性感染容易导致肝硬化和肝癌，在中国，HCV感染率呈逐年上升趋势。据研究报道，不同的miRNA能促进或抑制病毒的复制，但miR-141对HCV复制的影响目前尚不清楚，我们的研究目的之二拟探讨miR-141对HCV复制的影响及其机制，以期探索临床上治疗HCV感染的新靶点，具有重要的临床价值。方法：1．利用慢病毒载体感染Huh7，建立稳定高表达miR-141的Huh7-miR-141-LV及其阴性对照组Huh7-NC-LV；2. Transwell Assay检测miR-141在Huh7内高表达和被抑制后，对细胞迁移能力的影响；3. qRT-PCR检测miR-141在Huh7内高表达后对JFH1复制的影响；4. qRT-PCR及Western Blot分别检测细胞TGF-β、TLR/IRF信号通路中相关分子及MMP2/MMP9在mRNA水平及蛋白质水平的表达量；5.双荧光素酶报道基因检测IFN-β Luc的活性。结果：1.利用慢病毒载体感染成功建立了稳定高表达miR-141的Huh7-miR-141-LV。2. miR-141在Huh7中高表达后能显著抑制Huh7迁移，而被抑制后，Huh7的迁移能力上升,因此miR-141是影响Huh7迁移能力的个重要的因素。3.在Huh7中高表达miR-141后，可通过降低其靶基因TGF-β R1的mRNA水平和蛋白质水平的表达量，阻断TGF-β信号通路，进而抑制Huh7的迁移能力；在Huh7中高表达miR-141后,还可降低MMP2和MMP9的表达量。4. miR-141在Huh7中高表达后能显著抑制HCV毒株JFH1的复制能力，并成时间依赖性。5.在JFH1感染Huh7-miR-141-LV后，可促进TLR/IRF信号途径中的TLR7、TLR9、IRF7的mRNA水平和IRF3的蛋白质水平。6.在JFH1感染前后，Huh7-miR-141-LV中IFN-β Luciferase的活性都比Huh7-NC-LV中强，因此miR-141可能通过促进TLR7、TLR9和IRF3、IRF7的表达，激活IFN-β启动子，从而抑制JFH1在Huh7中的复制能力。结论：1. miR-141在Huh7中高表达后，通过TGF-β R1阻断TGF-β信号通路影响Huh7的迁移能力。MMP2和MMP9能促进肿瘤细胞的迁移，而miR-141在Huh7中高表达后,可明显降低MMP2和MMP9的mRNA水平和蛋白质水平的表达量,但miR-141对MMP2和MMP9的具体作用机制尚不清楚，还需进步深入研究。2.在病毒感染细胞后，激活TLR/IRF信号通路，进而诱导I型干扰素IFNα/β的表达，引起细胞的抗病毒免疫应答。miR-141可能通过促进TLR7、TLR9和IRF3、IRF7的表达，激活IFN-β的启动子，进而抑制JFH1在Huh7中的复制能力。TLR7、TLR9、IRF3和IRF7均不是miR-141的直接靶点，因此miR-141对TLR7、TLR9、IRF3和IRF7的作用机制还需实验进步确定。