背景:RNA剪接是真核生物基因表达的关键步骤之一。剪接因子SF3B1是U2小核糖核蛋白复合体（U2 sn RNP）的组成部分[1-3]。研究发现在多种癌症中均存在SF3B1的高频率突变,且SF3B1突变可使一些基因在3′端发生异常剪接[4-8]。在SF3B1突变的慢性淋巴细胞白血病细胞中,DVL2在3′剪接位点发生异常剪接,并导致其第11外显子上72个核苷酸的缺失,从而产生DVL2异构蛋白,由此增强Notch信号通路[9]。然而,SF3B1突变如何造成DVL2异常剪接的分子机制尚不完全清楚。目的:在293T细胞中探究SF3B1突变造成DVL2异常剪接的分子机制,确定DVL2异常剪接和正常剪接的分支点（BP）,分析正常剪接与异常剪接的分支点序列（BPS）与U2 sn RNP的亲和力,以及分支点距3′剪接位点的距离对U2sn RNP选择分支点进行剪接的影响,进一步明确DVL2的异常剪接是否依赖于正常剪接的Py tract（多聚嘧啶区）以及正常3′剪接位点。方法:在大多数癌症中SF3B1突变频率最高的是K700E突变,以K700E突变型为代表,探究SF3B1突变造成DVL2异常剪接的分子机制。使用在线工具SVM-BPfinde来预测DVL2正常剪接和异常剪接的候选分支点,并通过点突变实验验证DVL2正常剪接和异常剪接的分支点。将DVL2正常剪接和异常剪接分支点序列互换位置后,验证正常剪接和异常剪接分支点序列与U2 sn RNP结合的偏向性。另外,将DVL2正常剪接和异常剪接Py tract突变及删除后,验证正常剪接和异常剪接是否使用相同的Py tract。结果:我们的研究表明,通过SVM-BPfinder预测DVL2选择性剪接的分支点,并通过点突变实验证实了异常3′剪接位点上游第16位的腺苷酸为DVL2异常剪接的分支点,正常3′剪接位点上游第34位与第24位的腺苷酸都可作为DVL2正常剪接的分支点被使用。正常剪接和异常剪接BPS互换之后,SF3B1突变使U2 sn RNP更偏好使用与其具有高亲和力的BPS来介导RNA的剪接。DVL2的正常剪接使用两个BP进行剪接,通过对这两个正常剪接的分支点所在的BPS进行分析,将正常剪接的BPS1（正常3′剪接位点上游第34位腺苷酸所在序列）与BPS2（正常3′剪接位点上游第24位腺苷酸所在序列）互换之后,BPS1在DVL2的正常剪接中起主要作用,说明BPS的选择不仅取决于它与U2 sn RNP的亲和力,而且与BPS距3′剪接位点的距离有关。结论:癌症相关的SF3B1突变造成DVL2异常剪接不依赖于DVL2正常剪接的Py tract区域以及正常3′剪接位点。