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皱纹盘鲍是我国重要的海产经济贝类,在皱纹盘鲍生长发育的不同阶段会经历饵料转换过程,主要包括稚鲍剥离后从摄食底栖硅藻到人工配合饲料、幼鲍阶段多种饵料混合进行培养,如人工配合饲料、新鲜海带(Laminaria japonica)和盐渍海带等。饵料是影响皱纹盘鲍健康生长和发育的重要环境因子,饵料更换可能会影响酶活性和肠道菌群群落结构。本研究对皱纹盘鲍饵料更换后的关键时间节点进行取样,探究了皱纹盘鲍在转口期阶段和不同饵料条件下,体内酶活性和肠道菌群群落的动态变化,为皱纹盘鲍的健康养殖提供理论依据。本课题的主要研究结果如下:1.皱纹盘鲍稚鲍转口期阶段酶活性和肠道菌群的动态变化本实验通过酶活性测定和16S rDNA高通量测序,分析皱纹盘鲍转口前(T0)、转口后第10天(T10)、第30天(T30)和第60天(T60)的消化酶和抗氧化酶活性、肠道菌群结构组成和多样性的变化情况。结果表明,T0的α-淀粉酶(Amylase,AMS)活性显著高于T10、T30和T60;脂肪酶(Lipase,LPS)活性呈上升趋势,但在各组间均无显著性差异(P>0.05);胰蛋白酶(Trypsin)活性呈先降低后上升的趋势,在T10最低,T60最高。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性均呈先降低后增高趋势,其中T0的SOD酶活性显著高于T10、T30和T60(P<0.05),而CAT酶活性在T10最低。微生物群落分析结果表明,T0的肠道菌群Shannon和 Chaol 指数最高,T10 最低。γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)为转口期阶段优势菌纲。而在属水平上,转口期各组的优势菌属具有差异,并且呈现出在时间尺度上的特异性。在转口期前优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、拟杆菌属(Bacteroides)和阿赫兰氏菌属(Ahrensia),而转口期以弧形菌属(Vibrio)和极地杆菌属(Polaribacter)为主。此外,Formosa和Psychrilyobacter是T30和T60的特有优势菌属。LEfSe分析表明转口期过程中稚鲍肠道菌群的主要差异集中在T0和T60。PICRUSt2功能预测结果显示稚鲍肠道菌群的功能表达随着转口期的进行而改变,其中T0肠道菌群的主要功能与糖酵解、核苷酸和核酸合成以及脂类合成有关,而T30和T60以糖类合成和氨基酸合成为主。2.不同饵料对皱纹盘鲍幼鲍生长、体内酶活性和肠道菌群的影响本研究以饥饿(HG)为对照组,分别投喂新鲜海带(FG)、盐渍海带(SG)和配合饲料(AG),进行60 d的养殖实验,探究不同饵料条件对皱纹盘鲍的生长发育、消化酶和抗氧化酶活性、肠道菌群结构特征的影响。结果表明,人工配合饲料组皱纹盘鲍的壳长、壳宽、湿重和存活率均最大,但与新鲜海带和盐渍海带组之间无显著性差异(P≥0.05)。人工配合饲料组的3种消化酶(AMS、LPS和胰蛋白酶)和2种抗氧化酶(SOD和CAT)活性均为最高,其中AMS和胰蛋白酶活性呈不断增高趋势,LPS活性自40 d起便显著高于(P<0.05)其他三组。长期处于饥饿胁迫的幼鲍消化酶和抗氧化酶活性低于其他3组,其中CAT酶活性与实验初始相比显著下降(P<0.05)。皱纹盘鲍肠道菌群Alpha多样性结果表明,饥饿组肠道菌群多样性和丰度高于其他3组,人工配合饲料组的丰度次于饥饿组,多样性最低。NMDS分析表明新鲜海带和盐渍海带组样本距离较近,与人工配合饲料组差距最大。γ-变形菌纲、Fusobacteriia和芽孢杆菌纲(Bacilli)是4种饵料条件下的共有优势菌纲,而α-变形菌纲和疣微菌纲(Verrucomicrobiae)为饥饿组的特有优势菌纲。皱纹盘鲍肠道优势菌属以Psychrilyobacter、支原体(Mycoplasma)和弧形菌属为主,但不同采样时期不同饵料组相对丰度存在差异,其中配合饲料Psychrilyobacter和弧形菌属的增长趋势最明显,相对丰度最高。综上所述,皱纹盘鲍稚鲍转口期初期的高死亡率与酶活性和肠道菌群多样性降低有关,转口后的肠道优势菌群多为能降解配合饲料成分的细菌,对协助稚鲍顺利完成转口具有重要意义。在幼鲍阶段,摄食配合饲料更有利于提升幼鲍的消化酶和抗氧化酶活性,促进肠道有益菌属的增殖,改善生长效益。