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背景雷公藤内酯醇(Triptolide,TPL)是一种从植物雷公藤中提取的二萜内酯类化合物,具有免疫抑制、抗炎、抗增殖等多种生物学活性,是临床上公认的免疫抑制剂,主要用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病。近年来大量研究发现,TPL对乳腺癌、肺癌、肝癌、白血病等多种肿瘤均有不同程度的抑制作用。其机制与抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞的侵袭与转移等密切相关。而雷公藤内酯醇在抗食管癌等方面尚无相关研究。目的观察雷公藤内酯醇(TPL)及其联合顺铂对人食管鳞癌细胞株ECA-109体外活性的影响及可能机制,以期为治疗食管癌提供新的思路和理论依据。方法1.选取对数生长期的人食管鳞癌ECA-109细胞株,并进行以下分组:空白对照组(不经药物处理),单用TPL处理组(TPL浓度分别为6.25、12.5、25、50、100μg·L-1),单用顺铂处理组(浓度为4.17μmol·L-1),TPL联合顺铂组(TPL浓度为25μg·L-1,顺铂浓度为4.17μmol·L-1)。2.采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组不同时间段(24、48、72 h)的细胞增殖抑制率,并计算两药之间的交互作用。3.采用Western Blotting法检测各组细胞作用24h后活化型半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)的表达情况。结果1.MTT结果显示:同一时间点,不同浓度TPL组对ECA-109细胞增殖的抑制率明显高于空白对照组(P<0.05)且呈剂量依赖性(P<0.05);在同一药物浓度条件下,随作用时间延长,细胞增殖抑制率明显增加(P<0.05)且呈时间依赖性。同一时间点,TPL联合顺铂组对ECA-109细胞增殖的抑制率高于相同浓度各单药组(P<0.05)。2.Western-blotting结果显示:各组细胞处理24 h后,单用TPL组、顺铂组及联合用药组cleaved-caspase-3蛋白表达量均显著高于空白对照组(P<0.05),且联合两药用药组高于单用TPL、顺铂组(P<0.05)。结论TPL具有抑制食管癌ECA-109细胞增殖的作用,TPL联合顺铂能协同增加对食管癌ECA-109细胞的抑制,其机制与cleaved-caspase-3蛋白表达上调有关。