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胶质瘤作为一种最常见的颅内恶性肿瘤,严重的危害了人类的生命健康,但目前对它发病的分子机制尚不完全了解。众多报道显示Eps8与大多数癌细胞的迅速生长和细胞迁移密切相关。但是,Eps8在神经胶质瘤中的作用机制尚未研究。将32个胶质瘤样本和3个癌旁正常脑组织样本进行了免疫组化分析,结果显示Eps8在17个工V级胶质瘤样本中高表达,在14个Ⅳ级胶质瘤样本中中度表达,在1个Ⅲ级胶质瘤样本中低表达,在癌旁正常脑组织中不表达。这提示Eps8在大部分胶质瘤中高表达并且其表达水平可能跟胶质瘤的恶性程度相关。通过Western blotting检测了Eps8在不同的胶质瘤细胞系(A172、U251、SHG44)中的表达情况,发现Eps8在这些细胞系中均表达,而在U251中的表达明显比在SHG44和A172中的表达要低,说明Eps8在癌化程度不同的细胞系中有不同程度的表达。为了研究Eps8基因在胶质瘤发展中的作用,首先通过亚克隆技术构建了pEGFP-C3-Eps8重组质粒,将其转染进Eps8表达较低的U251细胞株,用400μg/mLG418筛选扩增细胞。通过荧光显微镜检测荧光定位和Western blotting检测细胞中Eps8的表达,证实成功地建立了稳定表达人Eps8基因的胶质瘤U251细胞系。通过细胞存活实验和MTT实验证实Eps8能促进U251细胞的增殖和提高U251细胞的相对活力。同时,集落形成实验也表明Eps8能提高U251细胞形成克隆的能力。这些结果都表明Eps8能够促进神经胶质瘤U251细胞的生长和增殖。通过流式细胞仪分析细胞周期,发现U251-GFP/Eps8细胞G1期细胞数目明显少于U251-GFP和U251二个对照组,而其S期细胞数目显著多于对照组,这表明Eps8能够促进U251细胞由G1期进入S期。最后,为了寻找Eps8促进胶质瘤U251细胞增殖的分子机制,Western blotting检测发现过表达Eps8后,β-catenin的表达上调,而caspase 3的表达下调。这提示Eps8可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路以及抑制凋亡标记基因caspase 3的表达来促进胶质瘤细胞的增殖。总之,这些结果提示Eps8在胶质瘤中可作为一个原癌基因促进细胞的增殖,从而在胶质瘤的发展中起作用。Eps8在临床诊断、治疗胶质瘤中可能是一个潜在的治疗靶点。