为了探索β-蜕皮激素与川牛膝甾酮对异色瓢虫(Harmonia axyridis Pallas)3龄幼虫解毒酶活性及基因表达的影响,并探索植物源蜕皮激素的安全剂量。本文采用喷雾法处理异色瓢虫3龄幼虫,用生化方法以及实时荧光定量PCR技术,研究了 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L5种浓度的β-蜕皮激素与川牛膝甾酮对异色瓢虫体内羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)、酸性磷酸酯酶(acid phosphatase,ACP)、碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GSH-ST)、细胞色素P450(Cytochrome P450)等5种解毒酶活性及羧酸酯酶(CarE)基因表达量的变化。结果表明:在低于1 mg/L浓度β-蜕皮激素处理下,异色瓢虫体内的CarEmRNA水平和CarE比活力的变化随着处理时间的延长呈现先升高、再恢复正常或略下降、再升高,然后恢复正常趋势。当浓度达到5 mg/L时,CarE mRNA水平和CarE比活力在处理24h后不再升高而是持续呈现下降状态。浓度达到1Omg/L时,CarE mRNA水平和CarE比活力始终呈现严重被抑制状态;不同浓度β-蜕皮激素对虫体ACP的活性产生抑制。浓度低于1 mg/L时,处理48h后,酶活性恢复正常。5 mg/L与10mg/L处理下,抑制作用随着时间的延长而加强;ALP活性在低于1mg/L处理下,随着处理时间的延长呈现先激活后被抑制再恢复正常的趋势。而5 mg/L处理后,酶活性在处理12h后一直呈现被抑制状态。浓度达到10mg/L,ALP活性始终被严重抑制。浓度低于5 mg/L时对谷胱甘肽-S-转移酶(GSH-ST)能够起到激活的作用,浓度为10mg/L时,GSH-ST活性始终呈现严重被抑制状态;当浓度低于1 mg/L时,虫体P450含量在处理24h后持续增高。浓度为5 mg/L时P450含量在处理48h后没有继续增加反而下降。浓度为10mg/L时,P450含量同样始终被严重抑制。在5种浓度川牛膝甾酮处理下,虫体内CarE活性呈现出先升高后降低之后恢复正常的趋势;除0.1mg/L外,其它浓度川牛膝甾酮处理后ACP活性呈现先被抑制后恢复正常的趋势,0.1mg/L处理后与对照无明显差异;ALP活性在处理后呈现先激活后被抑制的状态;0.1mg/L和0.5mg/L对异色瓢虫体内GSH-ST活性无明显影响。1mg/L和5mg/L只在处理12h后对GSH-ST活性有激活作用,24h后恢复正常。10mg/L处理后在4-12h均表现出明显的激活,24h后GSH-ST活性恢复正常;处理24h后5个浓度对P450含量都表现出增加的效果。上述研究结果可见,β-蜕皮激素与川牛膝甾酮对异色瓢虫3龄幼虫解毒酶有明显的影响。川牛膝甾酮相对更安全。在野外施用两种植物源蜕皮激素时,要注意控制浓度。