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目的:探讨二甲双胍抗肝癌机制中受体相互作用蛋白140(Receptor Interacting Protein 140,RIP140)的作用以及AMPK对RIP140的调控作用。方法:1、分别构建AMPK下调、RIP140下调的人肝癌SMMC7721细胞模型,利用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和Western blot(WB)法鉴定细胞模型.2、实验一:将实验分为三组:空白对照(Control)组、AMPK下调(AMPK/siRNA)组、RIP140下调(RIP140/siRNA)组,Western blot检测细胞内AMPK、P-AMPK、RIP140等蛋白的表达水平,CCK-8试验检测细胞增殖率,流式Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;3、实验二:将实验分为四组:空白对照(Control)组、二甲双胍(Metformin)组、AMPK下调+二甲双胍(AMPK/si RNA+Met)组、RIP140下调+二甲双胍(RIP140/siRNA+Met)组,Western blot检测细胞内AMPK、P-AMPK、RIP140等蛋白的表达水平,CCK-8试验检测细胞增殖率,利用流式Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:1、实验一结果:1)Western blot结果显示:与Control组相比,AMPK/siRNA组的AMPK、P-AMPK、RIP140的表达均减少(P<0.01);RIP140/siRNA组的仅有RIP140的表达减少(P<0.01);2)CCK-8结果显示:和Control组相比,AMPK/siRNA组和RIP140/siRNA组细胞增殖率均明显增加(P<0.01);3)流式Annexin V-FITC/PI结果显示:和Control组相比,AMPK/siRNA组、RIP140/siRNA组的细胞凋亡率均减少(P<0.05)。2、实验二结果:1)Western blot结果显示:(A)与Control组相比,Metformin组P-AMPK、RIP140的表达均增加(P<0.05);(B)与Metformin组相比,AMPK/siRNA+Met组AMPK、P-AMPK及RIP140的表达均减少(P<0.01);(C)与Metformin组相比,RIP140/siRNA+Met组RIP140的表达减少(P<0.01),而AMPK、P-AMPK的表达虽有所改变,但无统计学意义(P>0.05)。2)CCK-8结果显示:(A)与Control组相比,Metformin组、RIP140/si RNA+Met组的细胞增殖率均明显减少(P<0.01),而AMPK/si RNA+Met组的增殖率虽有所减少,但不具有统计学意义;(B)和Metformin组相比,AMPK/siRNA+Met组的增殖率明显增加(P<0.01),而RIP140/siRNA+Met组的增殖率虽有所增加,但不具有统计学意义(P>0.05)。3)流式Annexin V-FITC/PI结果显示:(A)与Control组相比,其它三组的凋亡率均有不同程度增高(P<0.05),其中Metformin组增高最明显;(B)与Metformin组相比,AMPK/siRNA+Met组的凋亡率显著降低(P<0.01),而RIP140/siRNA+Met组的凋亡率稍有降低(P<0.01),且AMPK/siRNA+Met组下降较明显。结论:1、AMPK的下调、RIP140的下调均具有促肝癌细胞增殖、抑肝癌细胞凋亡的作用;2、二甲双胍可激活AMPK,也使RIP140的表达上调。本研究结果提示,二甲双胍可通过AMPK/RIP140信号通路发挥抗肝癌作用,为进一步研究提供基础。