目的:　　 通过碱基互补原则将功能化磁珠与酶联功能化纳米金组装，构建一种新型的生物传感器比色法检测鼠伤寒沙门菌，从而建立一种简便、快速筛查鼠伤寒沙门菌的新型检测方法。　　 方法:　　 1.酶联功能化纳米金的制备与表征:将辣根过氧化物酶(peroxidasehorseradish，HRP)、鼠伤寒沙门菌脂多糖特异性适配体(aptamer)和小牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)组装到纳米金表面，构建一种纳米级多组分的酶联功能化纳米金。采用紫外—可见光吸收光谱技术，对纳米金颗粒（gold nanoparticles，AuNPs）、酶联纳米金(AuNPs/HRP)、酶联功能化纳米金(AuNPs/HRP/Aptamer)进行特征性吸收峰表征;利用透射电镜，对AuNPs、AuNPs/HRP/Aptamer进行形貌表征;设计与适配体互补的荧光修饰寡核苷酸序列，采用荧光吸收光谱技术，计算出纳米金表面寡核苷酸序列的修饰情况。　　 2.功能化磁珠的制备与表征:将氨基化修饰的探针偶联到醛基化修饰磁珠（magnetic microparticles，MMPs）表面，构建一种功能化磁珠。设计与探针互补的荧光修饰寡核苷酸序列，采用荧光吸收光谱技术，计算出磁珠表面核苷酸序列的修饰情况。　　 3.纳米生物传感器组装和条件优化:通过对酶联功能化纳米金HRP浓度、组装顺序、纳米生物传感器组装比例和时间等多个条件进行优化，从而对纳米金生物传感器的特异性和灵敏度进行评价。　　 4.鼠伤寒沙门菌的比色法快速检测:利用适配体与鼠伤寒沙门菌的特异性结合引起适配体结构改变，使纳米生物传感器“三明治”结构被破坏，在磁分离上清中加入四甲基联苯胺（tetramethyl benzidine，TMB），通过对数据的计算与分析来检测鼠伤寒沙门菌;研究检测体系和时间对纳米金生物传感器检测鼠伤寒沙门菌的影响;以不同细菌和不同浓度鼠伤寒沙门菌为研究对象，对纳米生物传感器的方法学特异性和灵敏度进行评价。　　 结果:　　 1.酶联功能化纳米金的制备与表征:经紫外—可见光光谱扫描证实，粒径为15nm的纳米金颗粒在520nm处有一个特征性吸收峰，加入HRP、aptamer均能使该吸收峰发生红移。经透射电镜表征证实，纳米金颗粒大小均一呈椭圆形，分散性好;酶联功能化纳米金表面整合有HRP和aptamer，电镜下清晰可见纳米金颗粒外有浅褐色外膜（aptamer直径太短，不能在电镜下直接观察）。经荧光分光光度计证实，每个纳米金上可以修饰10-11个适配体。　　 2.功能化磁珠的制备与表征:经荧光分光光度计证实，每克磁珠上可修饰连接约0.4mol的探针。　　 3.纳米生物传感器组装和条件优化:在HRP浓度为100μg/mL、以先在AuNPs表面修饰HRP再连接aptamer的顺序组装酶联功能化纳米金、酶联功能化纳米金和功能化磁珠体积比为6∶1、组装时间8min的条件下，纳米生物传感器的稳定性和灵敏度效果最好。　　 4.鼠伤寒沙门菌的比色法快速检测:在菌液加样体积为60μL、反应时间为20min、检测液和TMB体积比为1∶2的条件下，对鼠伤寒沙门菌的检测效果最好。在此条件下，本实验构建的纳米生物传感器对菌液进行检测，通过ΔA值的分析发现:纳米金生物传感器灵敏度高，最低检出限为103CFU/mL（信噪比≥3）的鼠伤寒沙门菌;稳定性强，对103CFU/mL鼠伤寒沙门菌检测8次的相对标准偏差为7.2％;特异性好，不与乙型副伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌等其他血清型的沙门菌有交叉反应，检测时间短，操作简便;在菌液浓度高时无需检测仪器，只需通过肉眼观察即可获得定性或半定量的检测结果。　　 结论:　　 本研究利用15nm纳米金将HRP、aptamer整合为酶联功能化纳米金，真正起到检测识别和型号放大一体化的效果;成功构建用于比色法快速检测鼠伤寒沙门菌纳米生物传感器，实现对鼠伤寒沙门菌的快速检测，为其它肠道病原菌的检测提供了宝贵的经验。