食欲素A(Orexin A)是一种由下丘脑分泌的激素,通过与G蛋白偶联受体结合从而广泛参与到生命活动与物质代谢中。前期本实验室得出绵羊卵巢黄体化颗粒细胞添加浓度为10nmol/L的Orexin A处理24h后孕酮分泌量升高的结论。本实验建立在前期结论的基础上,将添加OrexinA的绵羊卵巢黄体化颗粒细胞进行转录组测序及分析,得到表达量显著下降的ABCG1基因。由于ABCG1是一种促进胆固醇逆转运蛋白,能够维持细胞胆固醇稳态。胆固醇作为孕酮合成的前期原料,影响胆固醇的转运可能直接影响孕酮的合成和分泌。因此本实验对OrexinA、ABCG1、孕酮三者存在的联系进行探究。主要结果,将黄体化颗粒细胞添加Orexin A与对照组进行转录组测序分析,存在表达量显著差异的基因,其中包括下调的ABCG1。通过q-PCR验证结果证实黄体化颗粒细胞添加OrexinA后ABCG1基因表达量下降且显著差异,与测序结果一致;ELISA结果表明黄体化颗粒细胞经不同浓度ABCG1抑制剂处理后,孕酮分泌量上升且在浓度为20nmol/L时效果最佳。黄体化颗粒细胞添加ABCG1抑制剂再添加OrexinA后孕酮分泌量上升,说明抑制ABCG1能影响添加OrexinA的黄体化颗粒细孕酮的分泌;Western blot结果表明黄体化颗粒细胞添加Orexin A后ABCG1表达量下降,StAR表达量上升;黄体化颗粒细胞添加ABCG1抑制剂组后ABCG1表达量下降,StAR表达量上升;黄体化颗粒细胞添加ABCG1抑制剂再添加Orexin A后ABCG1表达量下降,StAR表达量上升。结果与q-PCR和ELISA结果相互印证,说明抑制ABCG1能影响黄体化颗粒细胞和添加OrexinA的黄体化颗粒细胞中ABCG1和StAR的表达量。本实验说明Orexin A可以通过ABCG1蛋白影响绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮,抑制ABCG1能促进Orexin A影响绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮。