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肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,其以发病隐匿、预后差、死亡率高为主要特征。HCC的早期诊断是影响患者预后的重要因素之一。目前,现有的检测手段还不能有效的早期发现HCC,因此,找到一种早期诊断HCC的标志物就显得十分重要了。研究发现,microRNA (miRNA)在肝癌组织中异常表达,它可能参与了肝细胞癌变及肝癌转移的病理过程。HCC的发生发展与病毒性肝炎、肝硬化等慢性肝病有着密切的关系,探讨miRNA在人类乙型肝炎病毒相关肝癌组织中的作用将有重要的意义。目的：现有研究表明,多种miRNA的差异表达与HCC的发生发展密切相关。本研究拟通过对人类乙型肝炎病毒(HBV)相关HCC及其癌旁组织：miRNA差异表达谱的研究,筛选与HCC特异的miRNA。方法：选取11例HCC患者的癌组织及其相应的癌旁组织,并提取各自的总RNA(包含miRNA),将11例癌组织和11例癌旁组织的总RNA分别混合在一起,作为各自反应的模板。利用RT2miRNA PCR Array检测88个人类癌相关miRNA在癌组织与癌旁组织中的表达差异谱,以二者相对表达量的倍数变化在2倍及其以上,表示miRNA在癌及癌旁组织有差异,以癌组织/癌旁组织计算,倍数≥2表示高表达,倍数≤0.5表示低表达。进一步选取正常肝组织(5例)、慢性乙型肝炎组织(CHB)(5例)、HCC患者癌组织(12例)及其相应的癌旁组织(12例),分别提取各自的总RNA,然后采用TaqMan qRT-PCR法检测let-7a在各组织的表达量,并对筛选结果进行验证。结果：本研究所有实验均重复三次,综合分析筛选实验结果,在88个(?)niRNA中,9个miRNA的扩增曲线或溶解曲线质量较差,予以剔除,则其余79个miRNA用于癌与癌旁组织间表达谱的分析。相对于癌旁组织,在癌组织中高表达的miRNA有9个,分别为-9、miR-25、miR-96、miR-183、miR-191、miR-372、 miR-18a、miR-196a、miR-301a,其中miR-96、miR-183、miR-196a具有统计学意义(P<0.05),分别较其癌旁组织升高4.746、7.127、3.498倍；同时,9个miRNA在癌组织中低表达,分别为let-7a、let-7b、let-7c、let-7e、miR-100、miR-138、 miR-214、miR-200c、miR-199a-3p,其中let-7c、miR-138具有统计学意义(P<0.05),分别较其癌旁组织降低3.945、4.790倍。另外,在79个质量好的miRNA中,有3个miRNA (miR-16、miR-21、miR-122)在癌组织及其相应的癌旁组织的相对表达量均高于其余76个miRNA。进一步以低表达的let-7a进行验证,正常肝组、慢乙肝组、癌旁组及癌组let-7a的相对表达量分别为1.071±0.401、0.926±0.477、0.881±1.214及0.535±0.719(P>0.05),虽无统计学差异,但从正常肝组织、慢乙肝组织、癌旁组织、肝癌组织中,let-7a的相对表达量呈现递减趋势。结论：本研究确定了HCC患者的癌组织与其相应的癌旁组织之间存在18个差异表达的miRNA,为进一步利用大样本开展miRNA作为诊断标志物的研究奠定基础。Let-7a的表达量逐渐下调的趋势,提示let-7a有可能参与了HCC的发生演变。