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面部色素沉着是由各种内、外因素引起的以面部色素形成过多为表现的病理性变化,临床上常见于黄褐斑、雀斑和黑变病等多种疾病。由于多方面因素的限制,目前尚缺乏安全有效的美白剂治疗。经临床观察,红景天外用制剂具有治疗黄褐斑的作用,我们基于这个事实,从细胞分子生物学角度,研究红景天在皮肤美白功能方面的药物作用机理。第一部分我们以黑素细胞为受试细胞,检测红景天甙对细胞的增殖、酪氨酸酶的活性及黑素合成的抑制作用。结果表明红景天甙对黑素细胞具有低细胞毒性,较强的细胞酪氨酸酶及黑素合成抑制作用。同时结果还表明,红景天甙对酪氨酸酶活性抑制的机制不是竞争性抑制,而是通过其它的途径抑制了酪氨酸酶的活性。论文第二部分应用半定量 RT-PCR 及Wester blot方法,检测红景天甙对酪氨酸酶mRNA转录和相应蛋白表达的调节作用。结果表明,一定浓度的红景天甙可以下调黑素细胞酪氨酸酶mRNA和蛋白的表达。初步推断,红景天甙可能是通过调节酪氨酸酶mRNA和蛋白的表达实现对黑素细胞黑素合成的抑制。第三部分建立紫外线照射致色素沉着细胞模型,检测红景天甙对紫外线照射致色素沉着的影响。试验结果显示,红景天甙对中波紫外线诱导黑素细胞黑素合成有明显的抑制作用。论文最后,我们建立了紫外线照射诱导豚鼠背部皮肤色素沉着模型,通过体表疗效评估、皮肤色素值测定以及组织病理染色观察,表明红景天外用制剂对豚鼠皮肤无明显刺激反应;对UVB诱导豚鼠皮肤黑素沉着有抑制作用。进一步表明红景天治疗色素沉着性疾病的安全性与有效性。通过上述实验,证实了中药红景天确有抑制皮肤黑素细胞黑素合成的作用。其作用的机理主要在于红景天甙直接抑制酪氨酸酶mRNA转录和蛋白的表达,而对酪氨酸酶活性无竞争性抑制作用。我们认为,无细胞系统蘑菇酪氨酸酶抑制实验适于美白中草药的初筛,而黑素细胞酪氨酸酶活性抑制实验能更准确地判定美<WP=5>白中草药的功效和机理。