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纤维素乙醇的研究近年来备受关注,为了提高纤维素水解物中主要糖类葡萄糖和木糖的高效利用,针对提高酿酒酵母菌株木糖利用能力及葡萄糖木糖共利用方面的课题得到大家广泛重视。通过敲除RPE1实现了葡萄糖和木糖的代谢偶联,并初步实现了葡萄糖和木糖的同步共利用。但是由于受到磷酸戊糖途径代谢流的限制,同步共利用的木糖比例很低,远达不到工业化生产纤维素乙醇的要求。本研究中着重对葡萄糖的代谢流进行调节,运用分子生物学手段对EMP途径和PP途径中的关键酶进行调控。用工具载体过表达的方法增强ZWF1的转录和表达,从而增强PP途径,采用替换启动子PGI1p的方法下调PGI1,从而弱化EMP途径。通过用强启动子TDH1p在多拷贝质粒pRS425K上过表达ZWF1使其转录强度达到原始菌株的130倍,对应G6PDH活性提高了30倍。其中以启动子TPI1p在多拷贝质粒pRS425K上过表达ZWF1后的菌株SyBE_Sc122001的葡萄糖和木糖消耗速率分别提高了80%和72%。但是过表达ZWF1后的菌株的乙醇得率并没有得到提高,反而稍微有所下降。通过PDA1p下调PGI1的表达后的菌株SyBE_Sc122041,其酶活约为原始菌株SyBE_Sc17004的1/5,同步共利用的木糖量提高了16.3%。下调PGI1后的菌株,乙醇得率普遍有所提高。在菌株中过表达ZWF1并同步下调PGI1所得菌株SyBE_Sc122042,其葡萄糖代谢速率与单独过表达ZWF1的菌株相比有进一步提高,但是同步共利用的木糖量却低于单独过表达ZWF1的菌株。在底盘菌株SyBE_Sc17004中融合表达ZWF1和HXK2后导致葡萄糖代谢速率降低,而木糖代谢速率和同步共利用的木糖量有所提高。敲除HXK1或HXK2后菌株的葡萄糖和木糖代谢能力均有所下降。