目的 制备金黄色葡萄球菌B型肠毒素（staphylococcus aureusenterotoxin B, SEB）的单克隆抗体（Monoclonal antibody, McAb），建立检测金葡菌B型肠毒素的ELISA检测方法，并进行初步的临床应用。 方法 以天然纯化的SEB免疫BALB／C小鼠，采用细胞杂交瘤技术，筛选出抗SEB的McAb，在此基础上建立双抗体夹心ELISA方法，用标准菌株和临床分离株进行评价，并初步应用于烧伤病人血清中SEB的检测。 结果 制备了抗SEB-McAb共六株，其中1C₈、1A₅、1D₁、3D₆分泌的McAb类型为Ig G1，2C₁₁、3A₉分泌的McAb类型为Ig G2a。6株中有4株仅与SEB发生反应，有两株与SEC₁有弱交叉反应，与大肠埃希菌、粪肠球菌、绿脓假单胞菌、腐生葡萄球菌均不发生反应。同时制备了抗SEB多克隆抗体1株。SEB-McAb诱导小鼠腹水纯化后效价为1：12800-1：25600，抗体亲和力常数为5×10⁷～2×10⁹。Western-blot实验显示出一条特异性条带，位于分子量28.5KDa处，证明了其特异性。用特异McAb建立了双抗体夹心ELISA法检测SEB，其敏感性高，达0.078μg/L，高于目前国内报道的水平。特异性强，重复性和稳定性均较好。双抗体夹心ELISA方法检测临床分离金葡菌肠毒素结果显示，耐甲氧西林金葡菌（MRSA）中肠毒素的总带毒率为93.9％，其中B型肠毒素带毒率最高，占检出的53.3％，其次为C型（28.5％）。甲氧西林敏感金葡菌的带毒率仅为28.6％，两者之间差异有统计学意义。重度烧伤病人血清中SEB水平明显高于对照组及轻度烧伤组，差异有统计学意义。 结论 制备了抗SEB-McAb，其效价较高，亲和力较强，特异性强。在此基础上建立双抗体夹心ELISA法检测SEB，灵敏性达0.078μg/L，特异性和重复性均较好，可用于临床分离菌株SEB的检测以及检测烧伤病人血清中的SEB。本方法为临床金葡菌感染的诊断和分型，为阐明SEB的临床意义提供了方法。