研究背景:单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)是一种具有双链DNA的包膜病毒,属于疱疹病毒家族的α亚科,是常见的人类致病病毒,可导致严重的疱疹病毒性脑炎。目前临床上常用的抗HSV-1药物主要是以阿昔洛韦(ACV)为代表的核苷类药物,治疗药物过于单一并且耐药愈发严重,因此,急需探寻新的抗病毒药物靶点。热休克蛋白90(Hsp90)在HSV-1增殖周期中起到重要作用,并且Hsp90抑制剂具有显著的抗病毒活性,因此,本课题主要对Hsp90抑制剂在HSV-1感染神经细胞中发挥的抗病毒药效和分子机制进行探究,为Hsp90作为新型抗HSV-1药物靶点提供理论基础。研究方法和结果:本课题通过病毒滴度实验检测了两种Hsp90抑制剂17AAG和AT533对HSV-1滴度的影响,通过q RT-PCR实验检测了Hsp90抑制剂对HSV-1/F株和三种ACV耐药病毒株增殖的影响;通过Western blot,q RT-PCR和空斑减数实验探究了Hsp90抑制剂以及si RNA干扰Hsp90α和Hsp90β对HSV-1感染神经细胞进入阶段的影响,且在原代神经细胞上进行了验证;最后,通过免疫荧光、流式细胞术和Western blot等实验探究了Hsp90在HSV-1感染神经细胞进入阶段发挥的功能和分子机制。实验结果显示Hsp90抑制剂对HSV-1/F株以及ACV耐药病毒株都具有抗病毒作用;Hsp90抑制剂抑制了HSV-1感染神经细胞进入阶段,具体来说,Hsp90抑制剂促进了HSV-1吸附,抑制了HSV-1穿膜;Hsp90抑制剂引起微丝聚合;Hsp90抑制剂导致微丝解聚因子Cofilin定位异常。结论与意义:Hsp90在HSV-1感染神经细胞增殖周期中起到重要作用,Hsp90抑制剂能够抑制HSV-1感染神经细胞,对ACV耐药病毒株也具有抗病毒作用,Hsp90抑制剂通过引起微丝解聚因子Cofilin亚细胞定位异常,导致微丝聚合促进伪足形成,有利于病毒吸附,但微丝聚合抑制了HSV-1穿膜,最终抑制了HSV-1进入神经细胞。该研究对Hsp90抑制剂在神经细胞中的抗病毒药效和作用机制进行了探究,为Hsp90作为新型抗HSV-1药物靶点提供理论基础。