脐血间充质干细胞对PHA诱导的淋巴细胞增殖的影响

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ary015
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目的:了解脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)对植物血凝素(PHA)诱导淋巴细胞(LCs)增殖的影响并与骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)作比较;探讨UCB-MSCs对PHA诱导的LCs增殖抑制实验中的最佳细胞量效比;测定UCB-MSCs各亚组转化生长因子(TGF-β1)水平及肝素对UCB-MSCs分泌TGF-β1的影响。 方法:对培养的UCB-MSCs和BM-MSCs进行形态、表型及功能方面的综合鉴定;将不同细胞浓度的UCB-MSCs和BM-MSCs加入由PHA诱导的LCs转化实验体系中,MTT法测定各亚组对LCs的抑制率。用ELISA法测定上清液中的TGF-β1水平。 结果:(1)用密度梯度离心的方法从UCB和人BM中分离单个核细胞(MNC),用贴壁法培养MSC,通过形态、表型及功能进行综合鉴定。培养至第3代的MSC具有长梭形的典型形态改变,表面分子检测显示高表达CD166、CD29、CD54,低表达CD13、CD34、CD45。经体外诱导可成为脂肪细胞。(2)MSCs:LCs为1:1、0.5:1、0.1:1、0.05:1、0.02:1、0.01:1时,UCB-MSCs组对PHA刺激的LCs增殖均有抑制作用,抑制率分别为49.5±4.8、58.4±6.0、38.1±4.0、31.4±3.2、24.3±3.2、12.6±6.7;而BM-MSCs组抑制率随BM-MSCs数量不同而异,分别为52.4±8.4、65.1±9.7、34.7-±4.5、13.0±6.4、10.7±12.6、-43.9±9.4。UCB-MSCs组及BM-MSCs组在MSCs:LCs为0.05:1、0.02:1、0.01:1的三个亚组间对LCs的抑制率存在显著差异(P<0.05)。UCB-MSCs组抑制率强于BM-MSCs组。(3)当UCB-MSCs:LCs为0.75:1时抑制作用最强,与其他亚组比较有显著差异(P<0.05)。(4)UCB-MSCs各亚组上清液中TGF-β1水平高于BM-MSCs组,呈细胞剂量依赖性;UCB-MSCs组抑制率与TGF-β1水平相关性略小
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