Tweens修饰猪胰脂酶及其对酶促酯交换反应的影响

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本文研究了醇水比、Tweens添加量和搅拌时间等因素对Tweens修饰PPLipase的影响,并讨论了溶剂体系中Tweens修饰的PLipase对催化酯交换反应的影响,初步研究了Tweens修饰的PPLipase催化酯交换反应时对棕榈酸、硬脂酸和油酸选择性的影响。Tweens修饰PPLipase的最佳修饰条件分别为:Tween20:醇水比1:2(v/v),添加量5%(Tween20占Tween20和PPLipase总重的百分比,下同),搅拌时间15min;Tween40:醇水比1:2(v/v),添加量10%,搅拌时间15min;Tween60:醇水比1:2(v/v),添加量5%,搅拌时间30min;Tween65:醇水比1:2(v/v),添加量5%,搅拌时间15min;Tween80:醇水比1:3(v/v),添加量5%,搅拌时间15min;Tween85:醇水比1:3(v/v),添加量5%,搅拌时间30min。修饰PPLipase可以提高其在溶剂体系中的热稳定性。在溶剂体系下Tweens-PPLipase和PPLipase催化酯交换反应的结果显示:T60-PPLipase、T80-PPLipase、T85-PPLipase在40℃、50℃、60℃、70℃时催化反应的酯交换量均高于PPLipase,且催化反应的酰基位移率不高于PPLipase。加酶量对Tweens-PPLipase催化酯交换反应的研究表明,在一定的酶浓度范围内,反应的酯交换量随加酶量的增加而提高。T20-PPLipase、T40-PPLipase、T60-PPLipase、T65-PPLipase、T80-PPLipase和T85-PPLipase的最佳加酶量均为15%。Tweens-PPLipase和PPLipase催化酯交换反应中对棕榈酸、硬脂酸和油酸的选择性的研究表明,Tweens对PPLipase的修饰并没有改变其对脂肪酸的选择性。
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