【摘 要】
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目前对CNTF的研究多集中于它的神经营养作用,对其肌肉营养作用研究甚少,对离体骨骼肌细胞的作用尚未见报道.该研究利用动物实验和细胞培养等方法,从在体和离体两方面较系统地
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目前对CNTF的研究多集中于它的神经营养作用,对其肌肉营养作用研究甚少,对离体骨骼肌细胞的作用尚未见报道.该研究利用动物实验和细胞培养等方法,从在体和离体两方面较系统地研究CNTF的肌肉营养作用,并制备CNTF单克隆抗体,为CNTF的机理研究提供手段,旨在为神经肌肉损伤和退行性疾病探索新的治疗方法.主要结果:1.CNTF可显著改善成年SD大鼠坐骨神经离断骨骼肌的萎缩和功能丧失.SD大鼠坐骨神经离断后,每公斤体重0.2mg的CNTF可:1)使损伤侧腓肠肌的单收缩强度提高27%、强直收缩强度提高40%,并明显增强其抗负荷耐力;2)显著降低坐骨神经离断后的肢残程度;3)使损伤侧肌肉湿重增加38%,胫前肌总蛋白含量增加24%;4)减轻损伤后骨骼肌横截面的萎缩,使损伤侧比目鱼肌肌纤维横截面积增加35%;2.去神经支配的骨骼肌细胞对CNTF的敏感性增强,且不同类型的髓骼肌,其敏感性改变也不相同,慢肌(比目鱼肌)比快肌(伸趾长肌)更敏感;3.CNTF可促进体外培养的L6-TG肌母细胞和新生SD大鼠原代骨骼肌细胞增殖,且原代骨骼肌细胞比L6-TG肌母细胞对CNTF更敏感;4.CNTF的肌肉营养作用具有一定的量效关系.离体情况下,CNTF在一定浓度范围内其促增殖作用随浓度增大而增大.在体情况下,CNTF0.2mg/kg剂量组其肌肉营养作用明显强于0.05mg/kg剂量组;5.CNTF在0.05mg/kg和0.2mg/kg剂量下是安全的,对成年SD大鼠肝、肾无明显毒性作用;6.成功地制备了高效价的CNTF单克隆抗体,抗体效价在1:10<6>(间接ELISA)以上.总之,该研究首次在国内成功地制备了高效价的CNTF单克隆抗体,首次发现CNTF对离体骨骼肌细胞有促增殖作用,进一步证明了CNTF对成年SD大鼠坐骨神经离断骨骼肌的营养作用,初步观察了CNTF的量效关系与毒性作用,为CNTF走向临床打下了基础.
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