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第一部分环王巴明对Du145细胞增殖和细胞周期的影响目的：研究Hedgehog信号通路阻断剂(环王巴明)对Du145细胞的抑制作用。方法：不同浓度(1、10、50、100μmol／L)环王巴明干预Du145细胞,分别在24、48、72 h后采用噻唑蓝比色法检测其对细胞的抑制作用；流式细胞术检测药物对细胞周期的影响；RT-PCR检测50μmol／L环王巴明作用48 h后实验组和对照组细胞周期蛋白E (Cyclin E) mRNA表达水平差异。结果：环王巴明对Du145细胞的抑制作用呈时效和量效依赖关系,当浓度>10μmol／L作用24 h后会显著抑制细胞增殖,10、50、100μmol／L浓度组对细胞的抑制率分别为：7.42%、12.70%、59.15%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测发现,当药物浓度达10μmol／L以上,干预48 h后G1期细胞比例明显升高。10、50μmol／L浓度组以及对照组的G1期百分比分别为：(60.13±2.75)%、(74.30±3.52)%、(52.17±2.21)%,差异有统计学意义(P<0.01),凋亡峰也逐渐增高；50 umol／L环王巴明作用48 h后Du145细胞Cyclin E mRNA表达显著降低,与空白对照组相比降低约61.90%(P<0.01)。结论：环王巴明可以抑制Du145细胞的增殖能力,其机制可能与下调Du145细胞Cyclin E mRNA表达水平,从而将Du145细胞阻滞于G1期。另外,环王巴明可以诱导Du145细胞凋亡。第二部分环王巴明诱导DU145细胞凋亡的机制研究目的：研究低浓度胎牛血清培养下环王巴明诱导Du145细胞凋亡的作用,检测环王巴明对Du145细胞GLi-1和Bcl-2 mRNA表达水平的影响,探讨环王巴明诱导Du145细胞凋亡的作用机制。方法：采用5、10μmol／L环王巴明处理Du145细胞,同时设立空白对照组。72h后透射电镜下观察细胞超微结构变化。流式细胞术检测药物作用后的细胞凋亡率变化,RT-PCR检测5、10μmol／L环王巴明作用72h后的实验组和对照组GLi-1、Bcl-2 mRNA表达水平差异；结果：环王巴明作用72h后,在透射电镜下可见细胞核固缩,染色质边集,细胞膜微绒毛减少等典型的凋亡形态学改变。而对照组的细胞形态正常,细胞膜表面可见许多微绒毛。5μmol／L组的GLi-1、Bcl-2 mRNA表达减弱,但与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),10μmol／L环王巴明可以显著下调GLi-1、Bcl-2 mRNA表达,与空白及DMSO对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；结论：环王巴明可诱导人前列腺癌Du145细胞株凋亡,其作用机制可能与下调GLi-1和Bcl-2mRNA表达,从而活化细胞凋亡的线粒体途径有关。