乳腺癌患者外周血清蛋白质组学初步研究

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目的:研究比较不同预后状态的乳腺癌患者外周血清低丰度蛋白的差异性表达情况,以期发现影响乳腺癌患者预后的新的生物标志物。方法:收集不同预后状况的乳腺癌患者外周血清,采用Agilent MARS亲和柱去除血清中六种高丰度蛋白,收集低丰度蛋白,用胰蛋白酶进行特异性酶切,形成多肽,用Agilent 1200系列液相色谱-芯片/质谱系统对酶切的混合肽进行差异性研究,并用Agilent Spectrum Mill蛋白数据库专业统计分析处理软件进行分析、鉴定。对研究结果,采用ELISA法进行验证。应用SPSS13.0软件进行统计分析。结果:1、蛋白质组学研究结果:预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)乳腺浸润性导管癌患者外周血清表达而预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)患者不表达的细胞膜蛋白有Mucin13、Desmoplakin、Desmoglein-1、ADAM 17、Monocytedifferentiation antigen CD14、Relaxin receptor 1和Tyrosine-protein kinase CSK。而预后差组乳腺浸润性导管癌患者外周血清中表达而预后好组患者不表达的细胞膜蛋白有Vitamin K-dependent protein C、Thrombospondin-1、Coagulation factor X和Coagulation factor IX。2、预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)与预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)中淋巴结受累1-3个、4-9个、10个及以上三个亚组间患者外周血清中sCD14浓度均有统计学差异,P<0.05。而预后差组中的三个亚组间无统计学差异,P>0.05。即LN+、ER-、PR-、HER2+的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与淋巴结转移个数间无直接的相关性。3、预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)与预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)中ER阳性程度≤30%、>30%,≤60%和>60%三个亚组间患者外周血中sCD14浓度均有统计学差异,P<0.05。而预后好组中的三个亚组间无统计学差异,P>0.05。即LN-、ER+、PR+、HER2-的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与不同ER阳性程度间无直接的相关性。4、预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)与预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)中PR阳性程度≤30%、>30%,≤60%和>60%三个亚组间患者外周血中sCD14浓度均有统计学差异,P<0.05。而预后好组中的三个亚组间无统计学差异,P>0.05。即LN-、ER+、PR+、HER2-的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与不同PR阳性程度间无直接的相关性。5、预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)与预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)中HER2(++)及HER2(+++)两个亚组间患者外周血清中sCD14浓度均有统计学差异,P<0.05。而预后差组中的两个亚组间却无统计学差异,P>0.05。即LN+、ER-、PR-、HER2+的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与HER2阳性程度间无直接的相关性。6、预后好组与预后差组患者癌组织中单核/巨噬细胞膜均有CD14表达,但两者间表达强度未见明显差异。7、80例乳腺浸润性导管癌患者外周血清sCD14M及sCD14浓度的ROC曲线中AUC分别为0.839和0.799,具有较高的敏感度、特异度及预测价值。结论:1、乳腺浸润性导管癌患者外周血清中高浓度的Mucin13、Desmoplakin、Desmoglein-1、ADAM17、Relaxin receptor 1和Tyrosine-protein kinase CSK可能提示较好的预后。2、乳腺浸润性导管癌患者外周血清中高浓度的Vitamin K-dependent protein C、Thrombospondin-1、Coagulation factor X和Coagulation factor IX可能提示较差的预后。3、LN+、ER-、PR-、HER2+的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与淋巴结转移个数间无直接的相关性。4、LN-、ER+、PR+、HER2-的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与不同ER阳性程度间无直接的相关性。5、LN-、ER+、PR+、HER2-的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与不同PR阳性程度间无直接的相关性。6、LN+、ER-、PR-、HER2+的乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度与HER2阳性程度间无直接的相关性。7、预后好组(LN-、ER+、PR+、HER2-)与预后差组(LN+、ER-、PR-、HER2+)乳腺浸润性导管癌患者其外周血清中sCD14浓度有统计学差异,P<0.05。8、预后好组与预后差组患者癌组织中单核/巨噬细胞膜均有CD14表达,但两者间表达强度未见明显差异。9、80例乳腺浸润性导管癌患者外周血清sCD14M及sCD14浓度的ROC曲线中AUC分别为0.839和0.799,具有较高的敏感度、特异度及预测价值。
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