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目的:通过观察补肾化痰方对痰湿型PCOS患者治疗前后的变化,应用超高液相色谱-质谱联用技术探索补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征的作用机制。方法:收集2012年12月至2013年12月黑龙江中医药大学附属第一医院妇科门诊多囊卵巢综合征患者36例,符合2003年鹿特丹多囊卵巢综合征诊断标准和中医辨证为痰湿型。签署知情同意书后,于月经周期或孕激素撤退性出血第三天采集临床资料及血清样本。采用补肾化痰方(成分:黄芪,仙灵脾,苍术,茯苓,丹参,黄连)治疗3个月经周期,方药均来自江苏江阴天江中药配方颗粒配伍。受试者每个月月经周期第2 2天测定血清孕酮结果,孕酮值小于3ng/ml的受试者于月经第22天给予孕激素撤退性出血治疗,如此干预3个月经周期。干预结束后于月经或孕激素撤退性出血第三天完善临床资料和血清样本采集。血清于-8 0摄氏度冰箱保存待试验结束后统一进行血脂、性腺激素的检测,并采用超高液相色谱-质谱联用技术筛选补肾化痰方治疗痰湿型P C O S前后血清代谢组学差异物。结果:(1)临床研究结果:①补肾化痰方治疗PCOS患者3个月经周期后,PCOS患者中医体质痰湿证候评分显著下降,具有显著性差异(P<0.05)。②补肾化痰方治疗后性激素结合球蛋白SHBG水平显著升高,具有显著性差异。③补肾化痰方治疗后空腹血糖、60min血糖和HOM A-IR下降,具有显著性差异。④补肾化痰方治疗后CHOL、LDL-C和ApoB水平显著下降,具有显著性差异。⑤补肾化痰方治疗后,体重、BMI、臀围、腰围,黑棘皮评分显著下降,具有显著性差异。⑥补肾化痰方治疗过程中,有6例妊娠,共98个月经周期,发生12个排卵周期,周期排卵率为12.2%。⑦补肾化痰方干预过程中,每个月进行定期随访,均未发现药物不良反应记录,干预结束后,检测肝功、肾功安全性指标,也未发现对肝、肾功能的不良反应。⑧亚组分析临床基线水平显示:P C O S胰岛素抵抗伴高胰岛素组SHBG水平低于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,具有显著性差异(P<0.05);PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组的OGTT试验30min、60min葡崔萄糖水平、空腹、30min、60min、1 20min胰岛素水平、胰岛素曲线下面积及HOMA-IR均高于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,具有显著性差异(P<0.05);PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组HDL-C水平低于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,而TG、ApoB水平高于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,具有显著性差异(P<0.05);PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组腰臀比WHR高于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,具有显著性差异(P<0.05)。(2)代谢组学研究结果:根据筛选出的差异变量,补肾化痰方治疗后共计鉴定出4个差异代谢物,主要涉及脂质代谢、氨基酸代谢等途径。补肾化痰方治疗后,与脂质代谢有关的游离脂肪酸水平显著下降,磷脂酰胆碱水平显著升高,与氨基酸代谢有关的鸟氨酸水平显著升高,甘氨酸水平显著下降。亚组分析代谢组学差异物显示:PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组、PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组共鉴定出32个显著性差异代谢物,主要涉及脂质代谢、氨基酸代谢和嘌呤代谢等途径。与脂质代谢相关的游离脂肪酸(FFA20:0、FFA22:0、FFA24:0、FFA 24:1和FFA 24:2)水平;溶血磷脂酰胆碱LPC22:0、磷脂酰胆碱(PC32:0、PC3 2:1、PC32:2、PC33:1、PC34:2、PC34:3、PC34:4、PC36:1、PC36:2、PC36:3、PC36:4、PC36:5、PC36:6、PC38:6、PC38:7、PC40:5)、磷脂酰乙醇胺 PE40:5、神经鞘磷脂(SM34:0、SM34:1、SM34:2、SM36:2、SM(d18:1/14:0)和 SM(d18:1/15:0))水平高于胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组,具有显著性差异;与氨基酸代谢有关蛋氨酸和苯丙氨酸水平低于胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,而与嘌呤代谢有关的尿酸水平高于胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,具有显著性差异(P<0.05)。结论:(1)补肾化痰方可显著降低痰湿型PCOS患者中医体质痰湿证候评分,改善PCOS痰湿证候。(2)补肾化痰方通过改善痰湿型PCOS患者性激素、糖脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗,降低痰湿型PCOS患者体重、体重指数、腰围和臀围,改善黑棘皮外在体征。(3)补肾化痰方可降低痰湿型PCOS患者关于脂质代谢的游离脂肪酸水平,揭示补肾化痰方通过调节脂质代谢紊乱改善胰岛素抵抗。(4)在干预结束后发现,PCOS胰岛素抵抗伴/不伴高胰岛素血症两组间的临床血清学指标和体格检查存在差异,PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素组SHBG、HDL-C水平低于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组;PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组空腹、30min、60min、120min胰岛素水平、胰岛素曲线下面积、HOMA-IR、TG、ApoB水平和腰臀比均高于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组。(5)在干预结束后发现,PCOS胰岛素抵抗伴/不伴高胰岛素血症两组间的血清代谢物存在差异,PCOS胰岛素抵抗伴高胰岛素血症组尿酸、游离脂肪酸、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂水平高于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组,而蛋氨酸、苯丙氨酸水平低于PCOS胰岛素抵抗不伴高胰岛素血症组。