【摘 要】
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目的: 1、观察超声波与微泡声学造影剂能否增强体外培养肿瘤细胞基因转染及其转染效率,初步摸索适宜的超声辐照条件。 2、观察经静脉注射粘附基因的微泡声学造影剂,同时经皮
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目的: 1、观察超声波与微泡声学造影剂能否增强体外培养肿瘤细胞基因转染及其转染效率,初步摸索适宜的超声辐照条件。 2、观察经静脉注射粘附基因的微泡声学造影剂,同时经皮超声辐照肝脏方式能否增强小鼠肝脏基因定位转染及其转染效率。 方法: 1、体外实验:将培养 HepG2 细胞分为 3 组,第 1 组为单纯造影剂转染组:加入 5μg 绿色荧光蛋白质粒(PEGFP-C1)与微泡声学造影剂混合液进行转染;第 2 组为脂质体转染组:用相同浓度 PEGFP-C1质粒进行常规脂质体转染;第 3 组为造影剂加超声辐照转染组:加入 5μg PEGFP-C1 质粒与微泡声学造影剂混合液,然后分别用 0.25W/cm2、0.5W/cm2、1.0W/cm2 超声波经培养板底部辐照 10s。24 小时后用荧光显微镜观察各转染组细胞荧光蛋白表达情况,计录每高倍视野(400×)荧光蛋白表达阳性细胞数。 2、动物实验:昆明种小白鼠 24 只,随机分为 4 组,每组 6 只。第 1 组为单纯质粒转染组:经尾静脉快速注入 2ml 含 20μg 乙型肝炎核心抗原(pcDNA3.1/HBV)质粒的生理盐水溶液。第 2 组为单纯微泡转染组:经尾静脉快速注入 2ml 含 20μg 质粒的微泡声学造影剂。第 3 组为单纯超声转染组:经尾静脉快速注入 2ml 含 20μg 质粒的生理盐水溶液,同时采用频率为 1MHz、声强为 0.5 W/cm2的超声波经小白鼠体表肝区辐照 1min。第 4 组为超声与微泡转染组:经尾静脉快速注入 2ml含 20μg 质粒的微泡声学造影剂,同时经小白鼠体表肝区局部采用相同
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