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研究背景及目的: 白细胞介素-34（Interleukin-34，IL-34）是近年来新发现的白介素家族成员，它有两个受体，CSF-1R和RPTP-ζ。IL-34与多种疾病的炎性反应和免疫反应有关。IL-34由多种细胞产生，并在人体多种组织中表达。目前，已知IL-34具有多种生物学功能，例如，增强单核细胞活力、加速破骨细胞形成等。MicroRNA-31（miR-31）是一个重要的基因调节分子，参与肿瘤细胞的增殖分化、迁移和转移等过程。通过TargetScan和MiRanda软件，我们预测IL-34基因的3端非编码区（UTR）中存在miR-31的结合位点。我们假设miR-31可能在调控IL-34的表达中发挥重要作用。首先，我们检测了IL-34和miR-31在多种细胞系中的表达水平。接着我们研究miR-31是否可以结合到IL-34基因的3UTR，以及miR-31对IL-34表达的调控作用，以阐明miR-31是否调控IL-34基因表达。 方法: 1.利用Western blotting方法检测在多种细胞(HepG2,GES-1,SGC-7901,HGC-27,MGC-803,HT-29,KYSE-450,MKN-45,U87MG）中IL-34蛋白的表达水平。 2.利用qRT-PCR的方法检测在多种细胞(HepG2,GES-1,SGC-7901,HGC-27,MGC-803,HT-29,KYSE-450,MKN-45,U87MG）中miR-31以及IL-34mRNA的表达水平。 3.利用分子克隆常用方法（PCR、琼脂糖凝胶电泳、胶回收、T载体连接、转化、双酶切、提质粒等）构建含有IL-34基因3UTR的psi-check2 plasmid，进一步利用质粒突变试剂盒把IL-343UTR的miR-31结合位点缺失突变掉构建突变plasmid。 4.将含有IL-34基因3UTR的psi-check2 plasmid、IL-343UTR的miR-31结合位点缺失突变plasmid，与miR-31 mimic、NC（Negative control）或miR-31inhibitor、inhibitor NC共转染MGC-803细胞，48小时后，试剂盒检测双荧光活性。 5.利用miR-31 mimic、NC转染MGC-803细胞，48小时后收集细胞，RNA结合蛋白免疫共沉淀后，qRT-PCR方法检测miR-31以及IL-34 mRNA的表达水平。 6.在所用到的几种细胞中，选择IL-34表达水平最高的HT-29细胞，以及miR-31表达水平最高的KYSE-450细胞，转染miR-31 mimic、NC、miR-31 inhibitor、inhibitor nc，48小时后，利用Western blotting和qRT-PCR分别检测IL-34蛋白和IL-34 mRNA、miR-31的表达水平。 结果: 1.IL-34 mRNA在不同的细胞中表达水平不一样（HT-29细胞中表达最高，KYSE-450细胞中表达最低）。 2.MiR-31在不同的细胞中表达水平不一样，且表达水平与IL-34 mRNA表达水平呈负相关。 3.MiR-31直接结合于IL-34 mRNA 3UTR。 4.MiR-31调节IL-34的转录后表达水平。 结论: MiR-31直接作用于IL-343UTR,并且负向调节IL-34的转录后表达水平。