活血利水法对子宫内膜异位症大鼠模型免疫相关细胞因子的影响

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chunxi1208
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目的:通过研究桂枝茯苓胶囊对子宫内膜异位症大鼠模型TNF-α、IL-10表达的影响,从免疫细胞因子水平探究活血利水法治疗子宫内膜异位症的作用机制,为临床用药提供实验和理论依据。方法:1.建立子宫内膜异位症大鼠模型:选取体重为180~220g雌性未交配的SD大鼠110只,适应性饲养一周后,通过阴道脱落细胞HE染色,建立动情周期档案。选出105只动情周期规律的大鼠,随机分为空白组10只,假手术组10只,其余85只大鼠在第三个动情期应用自体内膜移植法建立EMs模型,术后肌注庆大霉素预防感染,苯甲酸雌二醇促进异位内膜生长,并涂抹黄连素溶液防止大鼠撕咬切口、促进愈合。造模4周后,刮去大鼠下腹部毛发,观察异位病灶情况。如需进一步观察内部病灶形态,可切开皮肤查看并记录。2.灌胃:将造模成功的SD大鼠随机分为5组,分别为模型组、桂枝茯苓胶囊(高、中、低)组、散结镇痛胶囊组,给予空白组、假手术组及模型组灌胃生理盐水,其余药物组按照人每日临床剂量换算大鼠每日等效灌胃剂量,连续4周。3.指标检测:灌胃4周后,观察异位病灶生长情况,游标卡尺测量其大小,并做好记录。用HE染色观察大鼠在位内膜和异位内膜的组织形态,Elisa法检测大鼠血清中TNF-α、IL-10水平,PT-PCR检测各组大鼠在位、异位内膜IL-10、TNF-α的m RNA表达。结果:1.灌胃4周后,模型组肉眼可见异位病灶体积增大,呈囊性壁薄,表面有新生血管形成或紫蓝色结节,内含暗红色或红色囊液;用药组异位病灶体积有不同程度的萎缩,其中以桂枝茯苓胶囊高剂量组最明显,异位病灶萎缩变小,几乎全部吸收,仅留少许痕迹。桂枝茯苓胶囊中剂量组与散结镇痛胶囊组异位病灶体积较模型组明显缩小,少数与周围组织粘连。桂枝茯苓胶囊低剂量组异位病灶萎缩不明显,囊泡体积变化不大,与周围组织粘连紧密。2.模型组异位子宫内膜腺体数量显著增加,结构紊乱,腺腔明显增大,腺上皮细胞呈立方形或柱状,血管丰富且螺旋;用药组异位内膜腺体数量减少,腺腔变窄,腺上皮细胞呈扁平状,呈不同程度的萎缩,血管数目减少。其中以桂枝茯苓胶囊高剂量组最明显,桂枝茯苓胶囊中剂量组与散结镇痛胶囊组次之,桂枝茯苓胶囊低剂量组与模型组相比,变化不明显。3.实验结果显示,与空白对照组及假手术组相比,模型组异位内膜中TNF-α、IL-10含量及表达显著升高,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,各用药组异位内膜中TNF-α、IL-10含量及表达降低,具有统计学差异(P<0.05);TNF-α、IL-10的表达在桂枝茯苓胶囊高剂量组中下降最明显,桂枝茯苓胶囊中剂量组和散结镇痛胶囊组次之。结论:1.桂枝茯苓胶囊能抑制大鼠异位灶的生长,并能改善其组织病理学形态,使异位内膜萎缩、坏死,达到治疗EMs的目的。2.活血利水代表方桂枝茯苓胶囊治疗EMs的作用机制可能是下调细胞因子TNF-α、IL-10在EMs中的高表达,抑制了炎症级联反应,提高机体免疫功能,从而缩小异位病灶,且桂枝茯苓胶囊高剂量组治疗内异症效果最佳,说明血水互结是EMs发病机制,活血利水法是治病关键。
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